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文檔簡(jiǎn)介
1、[目的]
前列腺癌若能早期診斷、手術(shù)并聯(lián)合去勢(shì)治療,可取得良好的治療效果。但由于病情往往發(fā)展成去勢(shì)抵抗,前列腺癌仍位居美國(guó)男性癌癥死亡率的第二,在我國(guó)前列腺癌死亡率也日趨上升,目前急需新藥物緩解此情況。磷脂酰肌醇3磷酸激酶p110β是重要的細(xì)胞信號(hào)分子,在前列腺癌進(jìn)展中起至關(guān)重要的作用。最近我們利用納米技術(shù)制備攜帶p110β選擇性抑制劑TGX221的可識(shí)別前列腺膜抗原的PSMA RNA納米膠粒,將TGX221特異轉(zhuǎn)運(yùn)至前列腺癌
2、細(xì)胞。本研究旨在探討納米膠粒TGX221對(duì)前列腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用。
[方法]
1.通過(guò)LNCaP細(xì)胞建立裸鼠皮下移植瘤模型,光學(xué)顯微鏡下觀察不同濃度TGX221(6.25,12.5,25,50和100mg/kg體重)對(duì)各種器官組織的影響,并用高效液相色譜儀(HPLC)測(cè)定TGX221含量。
2.用LAPC-4、LNCaP、C4-2和22RV1細(xì)胞系建立裸鼠皮下移植瘤模型,加入納米TGX221、裸露TG
3、X221和PPG溶劑處理后,監(jiān)測(cè)腫瘤生長(zhǎng)情況,測(cè)量并記錄各時(shí)間點(diǎn)腫瘤體積大小,繪制生長(zhǎng)曲線。
3.切出移植瘤標(biāo)本,制成石蠟切片進(jìn)行免疫組化分析,測(cè)量AKT磷酸化情況和細(xì)胞增殖標(biāo)記物,包括Ki67、增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)以及5-溴脫氧尿嘧啶核苷(BrdU)。
4.利用TUNEL技術(shù)檢測(cè)移植瘤凋亡情況,實(shí)時(shí)熒光定量PCR測(cè)定移植瘤中前列腺特異性抗原(PSA)的表達(dá)。
[結(jié)果]
1.不同濃度的TGX
4、221(納米膠粒型和裸露型)處理后的組織器官均未見(jiàn)明顯的肉眼或顯微損傷,體內(nèi)TGX221含量分布排序?yàn)?移植瘤>腸>肝>前列腺>脾>腎。
2.與溶劑對(duì)照組相比,裸露TGX221阻斷LAPC-4和C4-2移植瘤生長(zhǎng),抑制LNCaP和22RV1移植瘤生長(zhǎng)的40-60%,而納米膠粒TGX221完全阻斷四種前列腺癌移植瘤的生長(zhǎng)。
3.加入兩種TGX221后,AKT磷酸化、Ki67、PCNA和BrdU的免疫信號(hào)均低于溶劑對(duì)照組
5、,其中納米膠粒型TGX221的效果更明顯。
4.納米膠粒TGX221處理組移植瘤出現(xiàn)中度凋亡率,裸露TGX221處理組標(biāo)本凋亡水平較低。
5.納米膠粒TGX221處理組PSA基因的mRNA表達(dá)水平明顯低于裸露TGX221處理組和溶劑對(duì)照組。
[結(jié)論]
1.靶向前列腺癌型納米膠粒TGX221完全阻斷前列腺癌移植瘤生長(zhǎng),是高選擇低損傷的抗前列腺癌強(qiáng)有效劑。
2.納米膠粒TGX221的抗癌作用
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