漢防己甲素對屈光術后haze的抑制作用及其機制的動物實驗研究.pdf

1、目的：研究漢防己甲素(tetrandrine，Tet)對屈光術后haze的抑制作用并對其作用機制和較好的用藥方式進行探討，以期發(fā)現(xiàn)一種抑制haze效果好而毒副作用又小的新藥，從而為屈光術后的臨床用藥提供新的選擇。 方法：選用72只健康新西蘭大白兔，建立PRK手術模型。第一部分：研究Tet術前和術后早期干預能否在創(chuàng)傷愈合早期對haze形成的啟動因素產(chǎn)生抑制作用。將其中24只隨機分為空白對照組、FML對照組(術前3d和術后4h聯(lián)合上

2、皮愈后點O．1％FML)、實驗A組術(術后4h聯(lián)合愈后點O．1％Tet)、實驗B組(術前3d和術后4h聯(lián)合愈后點O．1％Tet)四組。于術后4h和1m時光鏡下行角膜形態(tài)學觀察；TUNEL法檢測角膜基質細胞凋亡情況；免疫組化檢測損傷調控分子NF-кB的表達并光鏡下行陽性細胞計數(shù)分析。第二部分：研究Tet對PRK術后haze的抑制作用并探討其在創(chuàng)傷愈合過程中的作用機制和較好的用藥方式。將其余48只隨機分為空白對照組、FML對照組(角膜上皮愈

3、后點O．1％FML)、實驗I組(愈后點O．1％Tet)、實驗Ⅱ組(術前3d和術后4h聯(lián)合愈后點O．1％Tet)四組。分別于術后1m、2m、4m時用裂隙燈顯微鏡觀察并記錄各組haze分級；光鏡和透射電鏡進行形態(tài)學觀察；原位雜交法檢測角膜基質FN和III型膠原mRNA的表達，免疫組化檢測角膜創(chuàng)傷愈合調控分子TGF-p1和NF-r,B的表達，并應用ImageProPlus5．O圖像分析系統(tǒng)進行定量分析。 結果：①4h凋亡細胞數(shù)：實驗組

4、較FML組和空白組增多(P<0．05)，1m時各組基本無凋亡可檢出，組間比較無差異；②實驗組4hNF-кB胞核表達較FML組和空白組少(P<0．05)。③裂隙燈顯微鏡觀察，實驗組和FML組haze明顯較空白組減輕，且試驗組和FML組haze分級無差異；④實驗組和FML組角膜基質FN和Ⅲ型膠原表達均低于空白組，差異有顯著性意義；⑤實驗組和FML組TGF-β1表達較空白組低、NF-r,B的胞漿表達較空白組高，差異有顯著性意義；⑥實驗Ⅰ組ha

5、ze分級、ECM以及調控因子的表達與實驗II組比較差異無顯著性意義。 結論：①Tet在PRK術前和術后早期干預具有促進角膜基質細胞凋亡的作用；②Tet早期干預可抑制NF-кB的激活，且作用明顯強于FML。③Tet對屈光術后haze形成有明顯的抑制作用，與FML相當；④Tet可減少細胞外基質一FN、Ⅲ型膠原的生成；⑤Tet在愈合過程中也可降低角膜基質TGF-β1的表達和NF-кB的活性且作用強于FML；⑥實驗Ⅰ組與Ⅱ組各指標比較無