化瘤散結(jié)丹（含藥血清）誘導(dǎo)人宮頸癌細胞系Hela細胞凋亡的實驗研究.pdf

1、研究目的:1.運用血清藥理學方法研究抗腫瘤新藥化瘤散結(jié)丹對人宮頸癌細胞系HeLa細胞的生長抑制作用和凋亡誘導(dǎo)作用及對細胞周期的影響.2.探討化瘤散結(jié)丹抗腫瘤作用的可能機理.3.了解化瘤散結(jié)丹的急性毒理效應(yīng).研究方法:1.按照血清藥理學方法的要求制備含藥血清:將化瘤散結(jié)丹制成水煎劑給家兔灌胃,獲取兔血并分離血清.2.細胞培養(yǎng):將人宮頸癌細胞系HeLa細胞接種在含10％胎牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基中,置37℃含5%C0<,2>的培養(yǎng)箱

2、中培養(yǎng).3.選擇不同濃度的含藥血清與人宮頸癌細胞系HeLa細胞共同作用24小時,用倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài)學改變;用MTT還原法檢測光密度值(OD值),計算抑制率;用流式細胞術(shù)(FCM)檢測化瘤散結(jié)丹誘導(dǎo)HeLa細胞凋亡的效應(yīng)以及對細胞周期的影響.4.急性毒性實驗采用小鼠以口服灌胃方式給藥,連續(xù)觀察7天,統(tǒng)計動物死亡數(shù),獲取相關(guān)實驗數(shù)據(jù)并用改良寇氏法測定其LD<,50>.研究結(jié)論:1.化瘤散結(jié)丹(含藥血清)可抑制人宮頸癌細胞系HeLa細胞

3、的生長;2.化瘤散結(jié)丹(含藥血清)大、中劑量組可誘導(dǎo)HeLa細胞凋亡;3.化瘤散結(jié)丹(含藥血清)對HeLa細胞增殖周期有影響;細胞周期G<,2>/M期阻滯可能是化瘤散結(jié)丹誘導(dǎo)HeLa細胞凋亡的機制之一.4.化瘤散結(jié)丹(含藥血清)誘導(dǎo)HeLa細胞凋亡與藥物濃度及作用時間相關(guān):濃度太小,時間太短(2.5%,12h)不足以誘導(dǎo)凋亡;濃度太高,時間太長(15%,36h)容易引起細胞壞死.5.化瘤散結(jié)丹經(jīng)口灌胃的LD<,50>為:10.11g/k