蟾酥膠囊含藥血清誘導(dǎo)人肝癌BEL-7402細胞凋亡的研究.pdf

1、目的：研究蟾酥膠囊含藥血清對人肝癌BEL-7402細胞凋亡的誘導(dǎo)作用及蛋白Bcl-2、Fas、Apo2.7在肝癌凋亡細胞中的表達，探討蟾酥膠囊誘導(dǎo)人肝癌細胞凋亡的可能機制。 方法：選用純種成年新西蘭大白兔20只，隨機分為兩組，每組10只，用血清藥理學(xué)方法，一組制備含藥血清，另一組制備無藥血清。實驗組細胞分別加10％、20％、30％含藥血清，對照組細胞加10％無藥血清，分別孵育24h、48h，顯微鏡下觀察細胞形態(tài)學(xué)變化；用臺盼藍染

2、色檢測細胞藍染率；MTT(四甲基偶氮唑鹽)比色法檢測細胞抑制率；流式細胞儀檢測細胞凋亡率、細胞周期變化及Apo2.7蛋白的陽性表達率；免疫細胞化學(xué)法染色檢測蛋白Bcl-2、Fas的陽性表達率。 結(jié)果：相差顯微鏡下可見，實驗組部分細胞變小、變圓，貼壁能力明顯下降，呈漂浮生長狀態(tài)，集落生長特性明顯降低，呈單個生長狀態(tài)；臺盼藍染色顯示，細胞藍染率無明顯變化；MTT比色顯示，細胞存活率降低，細胞增殖明顯受到抑制；流式細胞儀檢測，可見明顯

3、的凋亡峰，細胞周期中G1、S期下降，G2/M期升高，Apo2.7蛋白表達增高，細胞凋亡率隨著藥物作用時間及含藥血清濃度的改變而改變；免疫細胞化學(xué)法染色顯示，Bcl-2蛋白表達降低，F(xiàn)as蛋白表達升高。各實驗組的上述檢測指標與對照組相比較，均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。 結(jié)論：蟾酥膠囊含藥血清可以誘導(dǎo)人肝癌細胞BEL-7402凋亡，且細胞凋亡率與藥物作用時間和含藥血清濃度呈一定的時效和量效關(guān)系；探討其誘導(dǎo)機制發(fā)現(xiàn)，可能與下調(diào)Bc