補氣中藥對骨髓抑制貧血小鼠造血調控的實驗研究.pdf

1、目的 人參為五加科多年生草本植物人參Panax Ginseng.C.A.Mey的根，為常用補氣要藥，具有大補元氣、補脾益肺、生津、安神的功效。西洋參：Panax Quinquefolium 1.同為五加科多年生草本植物的根，功效為補氣養(yǎng)陰、清火生津。黃芪為豆科多年生草本植物蒙古黃芪Astragalus membranaceus (Fisch)Bge.var.mongholieus(Bge)Hsiao或膜莢黃芪Astragalus me

2、mbranaceus(Fisch)Bge的干燥根，味甘性溫， 具有補氣行氣、生肌補血、健脾胃、壯筋骨等功效。本研究對三種補氣類中藥的皂甙提取物(TSPG、AMI和TSP)的補氣功能和機理進行了研究和比較。 方法 本研究采用復合造模法造成骨髓抑制貧血小鼠模型，應用造血祖細胞體外培養(yǎng)、流式細胞術、細胞因子檢測、免疫組織化學染色、RT—PCR、熒光定量PCR和Western Blot等技術。首次從細胞、蛋白質和基因表達水平對補氣類中

3、藥提取物的作用及其機理，進行了較系統(tǒng)深入的研究和比較。 結果 表明三種補氣類中藥提取物，在一定濃度范圍： 1． 能促進貧血小鼠外周血像的恢復、升高BMC數(shù)，尤其是對．RBC、PLT數(shù)升高、Hb的合成作用明顯。動物體內用藥可明顯促進造血祖細胞集落生長；造血祖細胞的體外用藥培養(yǎng)中，TSPG表現(xiàn)類生長因子樣作用，對造血祖細胞既有直接促進作用也有間接作用。西洋參莖葉皂甙對祖細胞的作用范圍較窄，主要對巨核系祖細胞生長呈現(xiàn)促進作用

4、，作用方式與人參有相似之處，既體現(xiàn)直接又有間接作用；而AMI似乎以間接調控為主。 2．可促進貧血小鼠升高BMC數(shù)，一方面促進靜止期BMC進入細胞周期，進而促進細胞增殖，另一方面促進抗凋亡蛋白Bcl—xL的表達，抑制凋亡的發(fā)生，維持細胞的存活。 3．可影響造血微環(huán)境。促進成纖維細胞集落增殖，通過促進基質細胞分泌造血生長因子，調控血發(fā)生。三種中藥促進造血生長因子表達的時間曲線略有區(qū)別。TSP在造血受損初期能促進TPO 的基因

5、表達，使骨髓抑制造成的血小板下降能提早得以恢復。 4．人參總皂甙、西洋參莖葉皂甙可調控造血生長因子受體EPOR的基因表達。從基因水平影響造血祖細胞對胞外刺激信號的應答；三種中藥都能促進轉錄因子GATA—1的基因表達，通過調控轉錄因子的基因表達影響其特定靶基因的轉錄。 5． 在不同濃度對對進K562細胞增殖都表現(xiàn)不同的調節(jié)作用，只有高濃度的TSPG促進GATA—1蛋白的增強表達，再一次顯示其獨特的生長因子樣活性。

6、 結論上述結果顯示，三種補氣中藥對造血的調控是多種途徑多層次進行的。一方面可以影響組成微環(huán)境的基質細胞的細胞因子基因表達或蛋白分泌，促進造血；另一方面也可以調控祖細胞本身的轉錄因子，進而調控生長因子或生長因子受體的基因表達，影響造血細胞對生長信號的應答，促進細胞進入增殖周期。補氣類三種中藥還可以通過促進抗凋亡蛋白的表達，抑制凋亡的發(fā)生，維持血發(fā)生過程中細胞的存活。而達到“補氣生血”的功效，本研究從首次比較了三種補氣中藥的共性和個性，

7、研究提示，它們雖然都能補氣生血，但作用環(huán)節(jié)和作用途徑不盡相同，有的似乎以間接調控為主；有的則既有間接作用又有直接作用；TSPG對粒系、紅系和巨核系三系均有影響， TSP 似乎只對巨核系造血個性功效顯著；TSPG和 TSP 能促進EPOR的基因表達，而AMI對此卻無明顯作用；雖然都能促進IL-6的分泌，但IL-6的分泌時間曲線是不同的；雖然補氣三種中藥對K562細胞增殖都表現(xiàn)雙向調節(jié)作用，只有TSPG促進GATA-1蛋白的增強表達；上述