急性百草枯中毒血清細(xì)胞因子動(dòng)態(tài)變化規(guī)律及治療的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本研究分為二部分： 第一部分 急性百草枯中毒血清細(xì)胞因子動(dòng)態(tài)變化規(guī)律的研究 背景：百草枯(paraquat，PQ)，國內(nèi)商品名為克無蹤。其中毒引起的病死率很高，國外報(bào)道病死率為40％～50％，而國內(nèi)個(gè)別報(bào)道高達(dá)80％以上。百草枯進(jìn)入人體可使肺、腎、肝和腎上腺出現(xiàn)損傷，而其中毒的特征性改變是肺損傷，表現(xiàn)為早期肺泡上皮細(xì)胞受損，肺泡內(nèi)出血水腫，炎癥細(xì)胞浸潤，晚期則出現(xiàn)肺泡內(nèi)和肺間質(zhì)纖維化，這種表現(xiàn)被命名為“百草枯肺”，是急性

2、呼吸窘迫綜合征(ARDS)的一種變異形式，也是 PQ 中毒患者的主要死亡原因。而近年來，肺纖維化機(jī)制研究取得了許多非常重要的進(jìn)展，特別是肺內(nèi)的多種類型細(xì)胞以及細(xì)胞因子在這一復(fù)雜過程中所起的作用引人注目，從而提出了肺細(xì)胞及細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的概念。肺泡巨噬細(xì)胞及其他肺結(jié)構(gòu)細(xì)胞合成的各種細(xì)胞因子如腫瘤壞死因子(tumor neciosis factor，TNF—α)、白細(xì)胞介素-1β(interleukin—1，IL—1β)、IL-6、IL-10

3、等在肺纖維化機(jī)制研究中取得了非常重要的進(jìn)展。然而，有關(guān)百草枯中毒導(dǎo)致的上述細(xì)胞因子的變化未見報(bào)道。 目的：觀察細(xì)胞因子腫瘤壞死因子-α(TNF—α)、白細(xì)胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10、在急性百草枯中毒動(dòng)物模型中的變化規(guī)律，探討百草枯中毒急性肺損傷的作用機(jī)制。 方法： 72只Wistar大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、百草枯高劑量染毒組(120 mg/kg)、中劑量染毒組(60 mg/kg)、低劑量染毒組(30 mg/k

4、g)，分為8、24、72 h 3個(gè)觀察時(shí)段，觀察不同劑量組在染毒后不同時(shí)間大鼠靜脈血細(xì)胞因子 IL-1β、IL-6、IL-10、TNF—α的動(dòng)態(tài)變化。 結(jié)果： 8、24、72 h各劑量組細(xì)胞因子的水平均增加，24、72 h組與對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或 P<0.01 )。72 h高劑量組各指標(biāo)與同時(shí)間點(diǎn)低劑量組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。72 h高、中、低3個(gè)劑量組與8 h時(shí)間點(diǎn)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

5、(P<0.05)。隨染毒濃度的增加，細(xì)胞因子水平逐漸增加。隨時(shí)間的延長，細(xì)胞因子的水平也在逐漸增加，存在一定的線性趨勢，在整個(gè)試驗(yàn)過程中表現(xiàn)出動(dòng)態(tài)的變化。 結(jié)論：在百草枯中毒急性肺損傷機(jī)制中細(xì)胞因子IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α可能起到了重要作用。 第二部分 血必凈注射液治療急性百草枯中毒的實(shí)驗(yàn)研究 背景：百草枯(paraquat，PQ)又名克蕪蹤、對(duì)草快，是一種目前廣泛使用的快速滅生性除草劑，噴灑

6、后能很快發(fā)揮作用，接觸土壤后迅速失活，一般在土壤中無殘留。正常使用情況下對(duì)野生動(dòng)物和環(huán)境少有危害，正確的使用對(duì)噴灑作業(yè)人員的健康影響也不大。但PQ如經(jīng)皮膚接觸、呼吸道吸入及誤服時(shí)，對(duì)人畜有較強(qiáng)毒性，均可造成急性中毒。PQ中毒是當(dāng)前內(nèi)科常見的急危重癥，病死率可達(dá)60.3％-87.8％。PQ進(jìn)入人體可使肺、腎、肝、心臟、腦和消化道出現(xiàn)損傷，患者最終多死于多臟器功能衰竭或呼吸衰竭。百草枯(paraquat，PQ)，國內(nèi)商品名為克無蹤，進(jìn)入人體

7、后即發(fā)揮毒性作用，而其中毒的特征性改變是肺損傷，表現(xiàn)為早期肺泡上皮細(xì)胞受損，肺泡內(nèi)出血水腫，炎癥細(xì)胞浸潤，晚期則出現(xiàn)肺泡內(nèi)和肺間質(zhì)纖維化，這種表現(xiàn)被命名為"百草枯肺"，是急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)的一種變異形式，也是PQ中毒患者的主要死亡原因。而近年來，肺纖維化機(jī)制研究取得了許多非常重要的進(jìn)展，特別是肺內(nèi)的多種類型細(xì)胞以及細(xì)胞因子在這一復(fù)雜過程中所起的作用引人注目，從而提出了肺細(xì)胞及細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的概念。肺泡巨噬細(xì)胞及其他肺結(jié)構(gòu)細(xì)胞合

8、成的各種細(xì)胞因子如腫瘤壞死因子一Q(TNF-α)、白細(xì)胞介素(IL)-6、IL-10、IL-1β、血小板衍生生長因子(PDGF)、胰島素樣生長因子-1(IGF-1)等在肺纖維化機(jī)制研究中取得了非常重要的進(jìn)展，并發(fā)揮重要的作用。血必凈注射液是以古方血府逐瘀湯為基礎(chǔ)，反復(fù)精煉篩選出的靜脈制劑，用于治療全身炎癥反應(yīng)綜合征(SIRS)和多臟器功能障礙綜合征(MODS)，取得較好的療效。作者在臨床上曾嘗試應(yīng)用血必凈為主治療百草枯中毒患者，初步顯示

9、較好的療效，然而其作用機(jī)制尚不清楚。本研究即細(xì)胞因子角度出發(fā)，探討血必凈注射液對(duì)百草枯中毒的治療保護(hù)作用機(jī)制。 目的：探討血必凈注射液對(duì)急性百草枯大鼠中毒臟器損害的治療保護(hù)機(jī)制。 方法：成年Wistar大鼠隨機(jī)分為百草枯250mg/kg劑量染毒對(duì)照組、百草枯250mg/kg劑量染毒+血必靜注射液高劑量治療組(1.72g生藥/kg)、百草枯250mg/kg劑量染毒+血必靜注射液低劑量治療組(0.86g生藥/kg)3組。取原

10、液加蒸餾水稀釋至1ml灌胃染毒。治療組于染毒后1小時(shí)經(jīng)鼠尾靜脈給予相應(yīng)劑量的血必靜注射液緩慢注射，觀察染毒組和治療組動(dòng)物表現(xiàn)。染毒8小時(shí)后處死動(dòng)物，留取動(dòng)靜脈血及大鼠肺組織，行動(dòng)脈血?dú)夥治?、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、堿性磷酸酶(AKP)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素(IL)-6、IL-10、IL-1β、血小板衍生生長因子(PDGF)、胰島素樣生長因子-1(IGF-1)測定，同時(shí)行常規(guī)病理觀

11、察。 結(jié)果：血必凈注射液治療組大鼠動(dòng)脈血?dú)庵笜?biāo)Pa02、PaC02、pH值明顯好于非治療染毒組，有顯著性差異(P<0.05或0.01)。治療組肝腎損害減輕，表現(xiàn)為ALT升高幅度較小，有顯著性差異(P<0.05)，血肌酐變化治療組明顯小于非治療組，有顯著性差異(P<0.05)。細(xì)胞因子TNF-α、IL-6血必凈治療組與染毒組比較無顯著性差別(P> 0.05)，而IL-10、IL-1β、PDG、IGF-1高劑量血必凈治療組均明顯小于