SD大鼠腦缺血再灌注及阿托伐他汀干預(yù)后HSP22和P-Akt表達變化研究.pdf

1、目的:觀察SD大鼠腦缺血再灌注后HSP22和P-Akt的表達變化及阿托伐他汀干預(yù)后對兩個蛋白表達的影響，探討HSP22和P-Akt在腦缺血再灌注中可能的作用機制以及阿托伐他汀在缺血再灌注中的可能保護機制。
　　方法:采用線栓法制作SD大鼠腦缺血再灌注模型，缺血2h，再灌注72h。52只雄性大鼠隨機分成正常對照組、假手術(shù)組、缺血再灌注組及阿托伐他汀干預(yù)組（阿托伐他汀+缺血再灌注）。正常組和假手術(shù)組不做任何處理，缺血再灌注組僅生理鹽水

2、灌胃，阿托伐他汀干預(yù)組在再灌注后大鼠蘇醒時、24h、48h分別予生理鹽水配制的10mg/kg阿托伐他汀灌胃。72h時處死所有大鼠，分別留取標本行TTC染色、HE染色及TUNEL染色，Western blot方法檢測HSP22、Akt、P-Akt及Caspase3表達變化;采用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計分析。
　　結(jié)果:
　　1、再灌注72h后，腦組織TTC染色發(fā)現(xiàn)阿托伐他汀干預(yù)組腦梗死體積(％)較缺血再灌注組明顯減小(16

3、.72±3.63％ vs.23.83±2.53％)。
　　2、TUNEL染色發(fā)現(xiàn)正常組及假手術(shù)組見極少TUNEL陽性細胞（1.00±0.76 vs.1.1±0.83）;缺血再灌注組TUNEL陽性細胞散在于整個缺血半暗帶，分布欠均勻，部分區(qū)域相對集中，高倍鏡下胞核呈棕褐色的為陽性細胞，與正常組及假手術(shù)組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.001);阿托伐他汀處理后，干預(yù)組TUNEL陽性細胞較缺血再灌注組明顯減少（25.13±3.18 v

4、s.43.88±4.12），差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.001)。
　　3、Western blot方法檢測發(fā)現(xiàn)，正常組和假手術(shù)組大鼠腦皮質(zhì)HSP22和P-Akt表達基本一樣（0.43±0.07 vs.0.45±0.10;0.66±0.04 vs.0.68±0.05），Caspase-3只有微弱表達（0.17±0.02 vs.0.19±0.04），兩組間比較無明顯差異(P＞0.05);缺血再灌注72h后，腦皮質(zhì)HSP22、P-Akt

5、及Caspase3表達均顯著增加(1.76±0.13 vs.1.67±0.10 vs.0.64±0.04)，與正常組及假手術(shù)組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.001)。但是，阿托伐他汀干預(yù)后腦皮質(zhì)HSP22和Caspase3表達減少(1.06±0.19 vs.0.34±0.08)，而P-Akt表達進一步增加(2.14±0.27)，與缺血再灌注組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.001)。
　　結(jié)論:
　　1、SD大鼠腦缺血再

6、灌注損傷后，作為對缺血應(yīng)激的反應(yīng)，HSP22/P-Akt/Caspase-3信號通路軸可能是內(nèi)源性自身保護機制之一。
　　2、阿托伐他汀可能作用于熱休克應(yīng)激反應(yīng)的起始環(huán)節(jié)，從而減輕腦缺血應(yīng)激反應(yīng)，使HSP22表達下調(diào);
　　3、阿托伐他汀能促進腦缺血應(yīng)激后P-Akt表達增加，PI3K/Akt信號通路可能是阿托伐他汀保護腦缺血再灌注損傷機制之一;
　　4、阿托伐他汀可以降低腦缺血再灌注后Caspase-3表達，具有抑制神