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文檔簡介
1、目的:腫瘤壞死因子-α(TNF-α)與哮喘密切相關(guān),運用TNF免疫調(diào)節(jié)劑(益賽普)對哮喘大鼠進行干預(yù),通過比較各組試驗大鼠炎癥指標及細胞因子水平,探討益賽普對哮喘大鼠的抗炎作用及其可能機制。
方法:按照隨機分組的原則,將30只SD 雄性大鼠隨機分組成3組,分別為哮喘組、益賽普組、對照組,每組10只。(1)哮喘組:于第1天、第8天及第15天分別給予無菌腹腔注射10%卵清蛋白(OVA)1 ml和氫氧化鋁100 mg的懸液致敏。
2、后于第16、17、18天置于密閉霧化罐中用1%OVA 霧化吸入激發(fā)。每天激發(fā)20分鐘致其出現(xiàn)喘息、呼吸急促或呼吸困難。(2)益賽普組:誘喘方法同哮喘組,從第1天開始(致敏或激發(fā)后1小時)每隔1天,給予皮下注射益賽普0.5mg/kg。(3)對照組:以生理鹽水代替OVA和益賽普。在末次激發(fā)后24小時,處死大鼠,收集肺組織及氣道灌洗液(BALF)。后將BALF離心后分離沉淀細胞及上清,并將肺組織經(jīng)脫水透明、石蠟包埋等處理后制作成肺標本切片。運
3、用Elisa方法對BALF上清中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平進行測定,以及用改良牛氏計數(shù)臺對BALF沉淀細胞進行計數(shù)并將沉淀細胞涂片染色后進行分類計數(shù)。運用免疫組織化學方法技術(shù)測定大鼠肺組織標本IL-4水平。最后通過統(tǒng)計學方法對各組指標數(shù)據(jù)進行分析比較。
結(jié)果:益賽普組大鼠BALF中TNF-α水平(196±13 pg/ml)較哮喘組(236±8 pg/ml)有明顯降低(p<0.01),細胞總數(shù)、嗜酸性粒細胞和中性粒細
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