抗IL-9抗體對小鼠哮喘模型的作用.pdf

1、目的:盡管大量證據(jù)顯示IL-9和哮喘有關,但未見應用IL-9拮抗劑治療哮喘的相關報道.該研究將外源性抗IL-9中和抗體應用于小鼠哮喘模型,通過比較不同干預措施(正常對照組、陽性對照組、地塞米松組、抗IL-9抗體組)對小鼠哮喘模型的影響情況,研究抗IL-9抗體對機體局部炎癥反應的影響以及主要免疫系統(tǒng)中T細胞功能的影響,旨在進一步證實IL-9在過敏性哮喘中的作用,了解阻斷IL-9在哮喘中的潛在治療價值.方法:第一部分:6-8周的雌性BALB

2、/c小鼠共20只,隨機分為2組:陰性對照組、陽性對照組,每組10只小鼠.陽性對照組小鼠在第0、7、14天腹腔注射OVA混懸液致敏.陰性對照組生理鹽水替代OVA混懸液進行腹腔內注射.第15~20天所有小鼠一起吸入OVA霧化溶液進行激發(fā),每天一次每次20分鐘.末次激發(fā)24小時后麻醉處死小鼠,眼球取血,全血離心后析出血清,測血清中的細胞因子.作支氣管肺泡灌洗液(BALF)的細胞計數(shù)和細胞因子檢測,并進行肺組織學檢查.第二部分:6-8周的雌性B

3、ALB/c小鼠共40只,隨機分為4組:陰性對照組、陽性對照組、地塞米松組、抗IL-9抗體組.分組后建立小鼠哮喘模型.除陰性對照組外,其它三組小鼠在第0、7、14天腹腔注射OVA混懸液致敏.陰性對照組采用生理鹽水替代OVA混懸液進行腹腔內注射.第15~20天所有小鼠一起吸入OVA霧化溶液進行激發(fā),每天一次每次20分鐘,其中地塞米松組和抗IL-9抗體組霧化前進行藥物干預.末次激發(fā)24小時后麻醉處死小鼠,取外周血測定血清中的細胞因子;作支氣管

4、肺泡灌洗液(BALF)的細胞計數(shù)和細胞因子檢測;并進行肺組織學檢查.第三部分:選取陽性無干預組、地塞米松組、抗IL-9抗體組三組小鼠.無菌操作取出脾臟,將其在金屬網上磨碎以制備單細胞懸液,細胞調至2×10<'6>個/ml,加入OVA作為抗原刺激.無菌分離出股骨,剪開股骨頭,暴露骨髓腔,用RPMI1640沖洗骨髓腔,制備骨髓細胞懸液,細胞調至2×10<'6>個/ml.脾細胞懸液和骨髓細胞懸液置于5％C02的潮濕環(huán)境中,37℃培養(yǎng)24小時后