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文檔簡介
1、目的:本研究旨在利用葉酸受體α作為腫瘤標(biāo)志物,通過腫瘤特異配體PCR的方法來檢測循環(huán)腫瘤細胞,并衡量這一方法應(yīng)用于膀胱移行細胞癌診斷的應(yīng)用價值。
方法:用免疫組化的方法檢測十例膀胱移行細胞癌組織中的葉酸受體α表達水平。同時通過酶聯(lián)免疫法檢測膀胱移行細胞癌患者和健康對照組的尿液(64例膀胱癌,20例對照)和血液(20例膀胱癌,23例對照)中葉酸受體含量。再利用Western blot和qRT-PCR的方法進一步驗證葉酸受體α在膀
2、胱移行細胞癌細胞系5637和SW-780中的表達水平。同時采集57例膀胱癌患者,48例健康對照組以及15例泌尿良性病變對照組患者3ml外周血,用基于葉酸受體α作為腫瘤標(biāo)記物的一套富集、鑒定和定量方法測定其循環(huán)腫瘤細胞水平。
結(jié)果:免疫組化分析和western blot分析都證實了葉酸受體α在膀胱移行細胞癌中高表達。膀胱移行細胞癌細胞系5637和SW-780中葉酸受體αmRNA的表達水平和血液中白細胞相比分別提高了650倍和15
3、倍。ELISA檢測也驗證了膀胱移行細胞癌組中的葉酸受體α顯著高于對照組(血清:p=0.0078;尿液:p=0.0001)??傮w來說,膀胱移行細胞癌組中的3ml外周血CTCs水平明顯高于對照組(median:26.5 Cu/3ml VS14.0 Cu/3ml; p<0.001)。通過ROC曲線計算這一方法用于膀胱癌診斷時曲線下面積為0.819,95% CI(0.738-0.883)。當(dāng)將閾值設(shè)為15.43 Cu/3ml時,這一方法檢測膀胱
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