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1、腦缺血再灌注性損傷是臨床上十分常見(jiàn)的病理生理現(xiàn)象,是病人死亡的主要原因之一。腦缺血再灌注損傷的機(jī)制主要包括:腦內(nèi)興奮性氨基酸的釋放及其受體的激活、細(xì)胞內(nèi)鈣離子超載及能量代謝障礙等。但臨床研究發(fā)現(xiàn),基于上述損傷機(jī)制的許多藥物治療并沒(méi)有取得十分理想的效果。因此,有學(xué)者提出缺氧引起的神經(jīng)元內(nèi)鈣離子超載所介導(dǎo)的酶促水解反應(yīng)可能是缺氧性腦損傷的主要原因。 缺血缺氧可引起神經(jīng)元膜電位發(fā)生一系列的改變,表現(xiàn)為細(xì)胞膜超極化,隨后發(fā)生緩慢去極化及
2、快速去極化,最終導(dǎo)致神經(jīng)元細(xì)胞的膜電位接近并維持在“0”mv水平,即持續(xù)去極化。而神經(jīng)元快速去極化往往是神經(jīng)元不可逆性缺氧性損傷的標(biāo)志。然而,缺氧期間神經(jīng)元發(fā)生去極化的機(jī)制迄今仍未完全闡明。研究證實(shí),缺血缺氧可以引起神經(jīng)元釋放大量興奮性氨基酸及細(xì)胞外液中K+離子濃度顯著增高。但腦內(nèi)興奮性氨基酸的大量釋放及神經(jīng)細(xì)胞外的K+濃度增高對(duì)神經(jīng)元膜電位的影響的研究仍較少。 Calpains和Cathepsins為半胱氨酸蛋白酶中的木瓜蛋白
3、酶超家族,廣泛存在于哺乳類動(dòng)物的細(xì)胞內(nèi),具有重要的生理作用。前者位于細(xì)胞漿中;而后者主要位于溶酶體內(nèi),具有多種亞型,其中cathepsinB在神經(jīng)元溶酶體中含量最為豐富。近來(lái)研究證實(shí),缺血缺氧過(guò)程中Calpains和Cathepsins的過(guò)度激活在神經(jīng)系統(tǒng)的缺血再灌注損傷的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要的作用。應(yīng)用生化及形態(tài)學(xué)方法的研究顯示,Calpains和Cathepsins抑制劑對(duì)缺血缺氧神經(jīng)元可以產(chǎn)生保護(hù)效應(yīng)。然而,使用該抑制劑能否促進(jìn)
4、缺血再灌注后神經(jīng)元功能的恢復(fù)還缺乏直接的證據(jù)。 本試驗(yàn)應(yīng)用急性分離的大鼠海馬腦片,結(jié)合細(xì)胞內(nèi)記錄技術(shù),研究:①興奮性氨基酸N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受體激動(dòng)劑NMDA及不同K+濃度的人工腦脊液(artificialcerebral-spinalfluid,aCSF)對(duì)大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元膜電位的影響;②Calpains抑制劑PD150606對(duì)缺氧期間大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元保護(hù)作
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