慢性間歇低氧對小鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元自噬的影響.pdf

1、目的：觀察慢性間歇低氧(CIH)對小鼠海馬CA1區(qū)自噬的影響，探討間歇低氧對海馬CA1區(qū)神經(jīng)元損傷的可能機制。
　　 方法：我們前期研究用間歇低氧艙與氣體控制系統(tǒng)建立了睡眠呼吸暫停模式的慢性間歇低氧小鼠模型，在此基礎(chǔ)上，選取ICR雄性幼鼠60只，隨機分為常氧對照組(unhandled control group，UC)30只和慢性間歇低氧組(chronicintermittent hypoxia group，CIH)30只，CI

2、H組根據(jù)低氧造模時間再分為間歇低氧3天(A組)、1周(B組)、2周(C組)、3周(D組)和4周(E組)組，采用透射電鏡觀察各組小鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元自噬泡等超微結(jié)構(gòu)的變化；并用Western-blot檢測各組小鼠海馬CA1區(qū)微管相關(guān)蛋白輕鏈3(LC3)-LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表達情況。各CIH組間及各UC組間比較用單因素方差分析，CIH組與其相應UC組比較用t檢驗。
　　 結(jié)果：(1)間歇低氧后小鼠海馬自噬泡等超微結(jié)構(gòu)改變：透射

3、電鏡觀察顯示，間歇低氧小鼠自第3天起發(fā)現(xiàn)神經(jīng)元胞漿內(nèi)可見線粒體嵴斷裂、腫脹變形、空泡化，并可見完整包裹雙層膜結(jié)構(gòu)的自噬小體，內(nèi)包裹較多物質(zhì)，溶酶體被激活、數(shù)目增加，同時可見高爾基體包含完整雙層膜結(jié)構(gòu)的自噬小體。
　　 (2)各組小鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元LC3蛋白表達：Western blot結(jié)果顯示，UC組小鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表達水平較低，且UC各組小鼠之間比較無統(tǒng)計學意義。CIH各組小鼠自間歇低氧3d

4、起，海馬CA1區(qū)神經(jīng)元LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表達水平即有所升高，與其各自對照組比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05或P<0.01)；隨著間歇低氧時間的延長，CIH組小鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表達呈逐漸增加趨勢，且CIH組各組間比較，差異均有統(tǒng)計學意義(p<0.05或p<0.01)。其中3w和4w組升至較高水平，分別升高60％和84％左右(P<0.01)，3d、1w和2w組LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表達較其各自對照組稍