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文檔簡介
1、目的:觀察慢性間歇低氧(CIH)對小鼠海馬CA1區(qū)自噬的影響,探討間歇低氧對海馬CA1區(qū)神經(jīng)元損傷的可能機制。
方法:我們前期研究用間歇低氧艙與氣體控制系統(tǒng)建立了睡眠呼吸暫停模式的慢性間歇低氧小鼠模型,在此基礎(chǔ)上,選取ICR雄性幼鼠60只,隨機分為常氧對照組(unhandled control group,UC)30只和慢性間歇低氧組(chronicintermittent hypoxia group,CIH)30只,CI
2、H組根據(jù)低氧造模時間再分為間歇低氧3天(A組)、1周(B組)、2周(C組)、3周(D組)和4周(E組)組,采用透射電鏡觀察各組小鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元自噬泡等超微結(jié)構(gòu)的變化;并用Western-blot檢測各組小鼠海馬CA1區(qū)微管相關(guān)蛋白輕鏈3(LC3)-LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表達情況。各CIH組間及各UC組間比較用單因素方差分析,CIH組與其相應UC組比較用t檢驗。
結(jié)果:(1)間歇低氧后小鼠海馬自噬泡等超微結(jié)構(gòu)改變:透射
3、電鏡觀察顯示,間歇低氧小鼠自第3天起發(fā)現(xiàn)神經(jīng)元胞漿內(nèi)可見線粒體嵴斷裂、腫脹變形、空泡化,并可見完整包裹雙層膜結(jié)構(gòu)的自噬小體,內(nèi)包裹較多物質(zhì),溶酶體被激活、數(shù)目增加,同時可見高爾基體包含完整雙層膜結(jié)構(gòu)的自噬小體。
(2)各組小鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元LC3蛋白表達:Western blot結(jié)果顯示,UC組小鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表達水平較低,且UC各組小鼠之間比較無統(tǒng)計學意義。CIH各組小鼠自間歇低氧3d
4、起,海馬CA1區(qū)神經(jīng)元LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表達水平即有所升高,與其各自對照組比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05或P<0.01);隨著間歇低氧時間的延長,CIH組小鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表達呈逐漸增加趨勢,且CIH組各組間比較,差異均有統(tǒng)計學意義(p<0.05或p<0.01)。其中3w和4w組升至較高水平,分別升高60%和84%左右(P<0.01),3d、1w和2w組LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表達較其各自對照組稍
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