長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸在半滑舌鰨親魚(yú)及幼魚(yú)中的營(yíng)養(yǎng)作用研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)以半滑舌鰨為養(yǎng)殖對(duì)象，探討飼料中不同水平的花生四烯酸(ARA)含量、DHA/EPA比例對(duì)親魚(yú)性腺中性類固醇激素合成的影響以及飼料中不同水平的DHA/EPA比例對(duì)半滑舌鰨幼魚(yú)生長(zhǎng)、脂肪酸組成和脂肪代謝的影響。實(shí)驗(yàn)在室內(nèi)流水養(yǎng)殖系統(tǒng)中進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)期間水溫范圍為20?26℃；鹽度，30?31；pH，7.4?8.5；溶解氧，5?7mg L-1；光照強(qiáng)度100?500lx。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
　　1、飼料中花生四烯酸含量對(duì)半滑舌鰨親魚(yú)性腺中

2、性類固醇激素合成的影響
　　以3齡未發(fā)育的半滑舌鰨親魚(yú)為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，來(lái)研究飼料中花生四烯酸(ARA)對(duì)性類固醇激素合成量以及合成過(guò)程中關(guān)鍵蛋白基因表達(dá)的影響。實(shí)驗(yàn)配制三組不同ARA含量的等氮等能飼料：對(duì)照組(C，ARA占總脂肪酸0.58％)和低水平組(ARA-L，ARA占總脂肪酸5.14%)、高水平組(ARA-H，ARA占總脂肪酸15.44%)。在室內(nèi)流水養(yǎng)殖系統(tǒng)中進(jìn)行為期3個(gè)月的養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，ARA添加組顯

3、著降低了雌魚(yú)血清中雌二醇的含量(P＜0.05)，但升高了雄魚(yú)血清中睪酮的含量(P＜0.05)。飼料中高水平的ARA顯著降低了卵巢中芳香化酶的基因表達(dá)量(P＜0.05)，但顯著增加了精巢中3β-羥基類固醇脫氫酶(3β-HSD)的基因表達(dá)量(P＜0.05)。在成熟卵巢中，低水平的ARA顯著降低了促卵泡激素受體(FSHR)、3β-HSD和17β-羥基類固醇脫氫酶(17β-HSD)的基因表達(dá)量(P＜0.05)；然而，在未成熟的卵巢中，其顯著增加

4、了FSHR、類固醇生成急性調(diào)節(jié)蛋白(StAR)、膽固醇側(cè)鏈裂解酶(P450ssc)、3β-HSD和17β-HSD的基因表達(dá)量(P＜0.05)。在所有性腺中，17α-羥化酶(P450c17)對(duì)飼料中ARA的反應(yīng)與其它性類固醇激素合成蛋白都不同。飼料中的ARA被優(yōu)先累積在舌鰨性腺中，ARA在發(fā)育成熟雄魚(yú)的性腺、肝臟、肌肉中累積量最高，而在發(fā)育成熟雌魚(yú)中的累積量最低。與雌魚(yú)相比，雄魚(yú)的性腺中含有高水平的DHA，但是在肝臟中DHA含量相對(duì)較低。

5、總之，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：飼料中 ARA能夠調(diào)節(jié)半滑舌鰨親魚(yú)性腺中性類固醇激素的合成并在性腺中實(shí)現(xiàn)累積，而且這些過(guò)程都因魚(yú)的性別和成熟階段而異，與發(fā)育成熟的雌魚(yú)相比，發(fā)育成熟雄魚(yú)和未發(fā)育成熟的雌魚(yú)可能需要更高水平的ARA。
　　2、飼料中DHA/EPA比值對(duì)半滑舌鰨親魚(yú)性腺中性類固醇激素合成的影響
　　以3齡未發(fā)育的半滑舌鰨親魚(yú)為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，研究飼料中DHA/EPA的比例對(duì)性類固醇激素合成量以及合成過(guò)程中關(guān)鍵蛋白基因表達(dá)的影響。實(shí)驗(yàn)

6、配制三組不同DHA/EPA比例的等氮等能飼料：D/E-0.68組(DHA/EPA比例為0.68)、D/E-1.09組(DHA/EPA比例為1.09)和D/E-2.05組(DHA/EPA比例為2.05)。在室內(nèi)流水養(yǎng)殖系統(tǒng)中進(jìn)行為期3個(gè)月的養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：與D/E-0.68組相比，D/E-1.09組顯著提高了雌魚(yú)血清中雌二醇（E2）的含量(P＜0.05)，而D/E-2.05組顯著提高了雄魚(yú)血清中睪酮（T）的含量(P＜0.05)。D

7、/E-1.09組顯著提高了卵巢中促卵泡激素受體(FSHR)、17α-羥化酶(P450c17)、類固醇生成急性調(diào)節(jié)蛋白(StAR)及3β-羥基類固醇脫氫酶(3β-HSD)基因的表達(dá)量(P＜0.05)。而在精巢中，D/E-1.09組和D/E-2.05組提高了 FSHR、膽固醇側(cè)鏈裂解酶(P450ssc)以及3β-HSD的表達(dá)量，P450c17表達(dá)量在D/E-2.05組顯著高于其他兩組(P＜0.05)。魚(yú)體組織中DHA/EPA比例隨飼料中DH

8、A/EPA比例的上升而上升(P＜0.05)，但是各實(shí)驗(yàn)組中DHA的含量都明顯高于EPA。性腺中雄魚(yú)的DHA的含量明顯的高于雌魚(yú)，說(shuō)明雄魚(yú)可能需要更高的DHA。總之，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：在DHA+EPA總量一定的情況下，飼料中DHA/EPA比例能夠調(diào)節(jié)半滑舌鰨親魚(yú)性腺中性類固醇激素的合成，而且這些過(guò)程都因魚(yú)的性別而異，雄魚(yú)可能需要更高DHA/EPA比例的飼料。
　　3、飼料中DHA/EPA比值對(duì)半滑舌鰨幼魚(yú)的生長(zhǎng)性能、脂肪酸組成以及脂肪代

9、謝相關(guān)基因表達(dá)的影響
　　以半滑舌鰨幼魚(yú)(23.40±0.08g)為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，來(lái)研究飼料中不同DHA/EPA的比例對(duì)半滑舌鰨幼魚(yú)生長(zhǎng)性能、脂肪酸組成以及脂肪代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響。配制六組不同DHA/EPA比例的等氮等能飼料，DHA/EPA的比例是0.61、1.02、1.46、1.91、2.32以及2.75，分別表示為D/E-0.61、D/E-1.02、D/E-1.46、D/E-1.91、D/E-2.32以及D/E-2.75組。在

10、室內(nèi)流水養(yǎng)殖系統(tǒng)中進(jìn)行為期80天的養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，隨飼料中DHA/EPA比例的上升，終末體重、增重率(WG)出現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)(P＜0.05)，并且在DHA/EPA比例為1.46和1.91時(shí)出現(xiàn)最大值。飼料效率（FE）也出現(xiàn)類似的變化趨勢(shì)。但是，攝食率(FI)、成活率(SR)、肝體比(HSI)、臟體比(VSI)及肥滿度(CF)在各處理組間沒(méi)有顯著差異(P＞0.05)。魚(yú)體脂肪含量隨著飼料中DHA/EPA比例升高也出現(xiàn)先上升后

11、下降的趨勢(shì)，并在DHA/EPA比例為1.02和1.46時(shí)出現(xiàn)最高值(P＜0.05)。魚(yú)體組織脂肪酸組成與飼料中脂肪酸組成基本一致，并且在各處理組魚(yú)體組織中DHA的含量都遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于EPA的含量。隨著飼料中 DHA/EPA比例的上升，PPARα2(過(guò)氧化物酶體增殖劑激活受體α2亞型)和 ACO3(乙酰輔酶A氧化酶3亞型)基因表達(dá)量呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)(P＜0.05)，PPARγ(過(guò)氧化物酶體增殖劑激活受體γ亞型)、SREBP(膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白

12、)、ACC(乙酰輔酶A羧化酶)、FAS(脂肪酸合成酶)以及ATGL(甘油三酯脂肪酶)基因表達(dá)量呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)(P＜0.05)，GPAT4(甘油-3-磷酸?；D(zhuǎn)移酶4亞型)基因在DHA/EPA比例為1.02、1.46以及2.75組的表達(dá)量顯著高于其他組(P＜0.05)，而CPT-1α(肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1α亞型)基因和PPARα1(過(guò)氧化物酶體增殖劑激活受體α1亞型)基因在各處理組間沒(méi)有顯著的差異(P＞0.05)。綜上所述，在DH