OMEGA-3多不飽和脂肪酸在新生大鼠腦缺血缺氧損傷中的作用及機(jī)制研究.pdf

1、新生兒缺血缺氧性腦病是引起圍產(chǎn)期嬰幼兒急性死亡和永久性神經(jīng)功能缺陷的臨床疾病。雖然在過去幾十年的研究中,對缺血缺氧性腦損傷的機(jī)制已經(jīng)有比較深入的了解,但是,目前為止仍然缺乏有效的治療手段和干預(yù)措施。OMEGA-3(n-3)多不飽和脂肪酸,作為一類重要的不飽和脂肪酸,在腦內(nèi)含量極為豐富,主要分布于神經(jīng)元細(xì)胞膜特別是神經(jīng)突觸前膜上,并且對于維持腦的解剖結(jié)構(gòu),生化和生理功能的完整性具有極為重要的作用。以往的研究發(fā)現(xiàn),作為n-3多不飽和脂肪酸家

2、族中的重要成員,DHA在成年大鼠缺血性腦損傷中具有顯著的神經(jīng)保護(hù)作用,但是其作用機(jī)制目前尚不清楚。因此,我們的研究主要目的是:證實(shí)n-3多不飽和脂肪酸在缺血缺氧性腦損傷中的作用,并深入探究n-3多不飽和脂肪酸的神經(jīng)保護(hù)機(jī)制。
　　在雌性大鼠懷孕后第2天至產(chǎn)后第14天期間,分別給予正常食物和富含n-3多不飽和脂肪酸的魚油食物干預(yù)。對7日齡新生大鼠行左側(cè)頸總動脈永久性結(jié)扎手術(shù),恢復(fù)1.5小時后,進(jìn)行持續(xù)2.5h的缺氧處理,之后放回母鼠

3、身邊飼養(yǎng)。在術(shù)后指定時間點(diǎn)灌注固定組織,冰凍切片,焦油紫染色分析腦組織體積缺失。翻身反射和走步實(shí)驗(yàn)于術(shù)后第2天至第5天進(jìn)行,以評估短期行為功能變化;同時,術(shù)后第2周至第5周依次進(jìn)行踏步和水迷宮實(shí)驗(yàn)評估長期行為功能改變。在母鼠食物干預(yù)的最后一天,分析其新生鼠(14日齡)的皮層腦組織脂肪酸含量。蛋白表達(dá),DNA損傷和細(xì)胞死亡分析主要在術(shù)后0到24小時進(jìn)行;用定量PCR分析腦損傷后24小時炎癥因子的表達(dá),同時觀察炎癥細(xì)胞的激活。另外,利用體外

4、培養(yǎng)的原代神經(jīng)元細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞以證實(shí)n-3多不飽和脂肪酸的腦保護(hù)機(jī)制。
　　研究結(jié)果顯示,對懷孕大鼠給予富含n-3多不飽和脂肪酸的魚油食物干預(yù)可以顯著增加新生大鼠腦組織中的n-3多不飽和脂肪酸的含量,并且抑制了缺血缺氧性腦損傷引起的n-3多不飽和脂肪酸含量的下降。n-3多不飽和脂肪酸明顯減少了缺血缺氧性腦損傷所引起的組織缺失和神經(jīng)功能缺陷,以及由氧糖剝奪引起的神經(jīng)元死亡。n-3多不飽和脂肪酸通過增強(qiáng)Akt的磷酸化進(jìn)而促進(jìn)了神經(jīng)元

5、的存活。n-3多不飽和脂肪酸同時可以通過抑制轉(zhuǎn)錄因子NF-κB所介導(dǎo)的炎癥因子的表達(dá)來降低缺血缺氧性損傷和LPS引起的小膠質(zhì)細(xì)胞的活化,進(jìn)而發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。
　　總之,新生大鼠腦內(nèi)n-3多不飽和脂肪酸含量的增加可以顯著降低缺血缺氧損傷引起的神經(jīng)元死亡和神經(jīng)功能缺陷,并且具有長效的神經(jīng)保護(hù)作用。n-3多不飽和脂肪酸不僅促進(jìn)神經(jīng)元Akt的磷酸化發(fā)揮直接的神經(jīng)保護(hù)作用,而且可以抑制小膠質(zhì)細(xì)胞的激活和炎癥因子的釋放,間接的降低炎癥引起的