二甲基精氨酸二甲胺水解酶1基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓易感性的關聯研究.pdf

1、原發(fā)性高血壓或高血壓病是由環(huán)境與遺傳因素共同作用所致的多基因疾病，個體間血壓的變異30～60％是由遺傳因素所決定的。血管內皮在維持心血管系統(tǒng)的穩(wěn)態(tài)中起極其重要的作用，內皮功能受損是包括高血壓病在內的多種心血管疾病的早期表現。NO是維持血管內皮功能最重要的一種介質之一，由L-精氨酸在一氧化氮合酶(NOS)的催化作用下生成。NO彌散進入血管平滑肌細胞后，激活腺苷酸環(huán)化酶引起血管平滑肌松弛，血管舒張。非對稱二甲基精氨酸(ADMA)是一種內源性

2、NOS抑制劑，能競爭性的抑制NO的生成。血漿中的ADMA 80％經二甲基精氨酸二甲胺水解酶1和2(DDAH1和DDAH2)水解代謝而失活。因此，體內DDAH酶活性的高低可通過影響ADMA的代謝，從而影響NOS的活性和NO的水平，而遺傳因素可能是影響體內DDAH酶活性的因素之一。由遺傳因素所導致的個體間DDAH酶活性的差異可能通過影響ADMA的體內濃度，從而影響機體對高血壓病的易感性。 目的：通過病例-對照研究，探討DDAH1基因

3、多態(tài)性與中國漢族人群高血壓病遺傳易感性的關系。 方法：應用NCBI數據庫中的公用資源，對中國人群DDAH1基因的單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism，SNP)進行登記，通過連鎖不平衡分析和單倍型構建，分析該基因區(qū)域SNP位點間的連鎖不平衡情況，選擇待分型的單倍型標簽SNP(haplotype tag SNP，htSNP)。應用聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)的分析方法

4、，在417例原發(fā)性高血壓患者和436例健康人群中對DDAH1基因的單倍型標簽SNP進行基因分型。應用高效液相色譜-質譜(HPLC-MS)聯用法檢測血漿中ADMA的水平。應用χ2檢驗比較組間基因型及等位基因頻率的分布的異同，應用非條件Logistic回歸分析對風險因素進行校正，確定DDAH1基因型與高血壓病遺傳易感性間的相關關系。 結果：①中國人群DDAH1基因位點共發(fā)現了29個常見SNP，這些SNP導致該基因區(qū)域6種主要單倍型形

5、成。②病例組和對照組中DDAH1 C143611G(rs3087894)位點CC、CG和GG基因型頻率分別為57.4％、33.8％和8.8％以及51.6％、42.1％和6.3％，兩組間基因型的分布存在顯著的差異(P<0.05)；C144563T(rs3813600)位點CC、TC和TT基因型頻率分別為45.6％、45.4％和9.0％以及55.2％、37.8％和7.0％，兩組間基因型的分布也存在顯著的差異(P<0.05)。③通過對性別、發(fā)

6、病年齡、吸煙、飲酒、高脂血癥的有無以及一級親屬高血壓病家族史的有無等高血壓的風險因素進行校正，Logistic回歸分析結果顯示，與基因型為143611CC的個體相比較，基因型為143611CC和143611GG的個體患原發(fā)性高血壓病的風險顯著降低(OR=0.701，95％CI：0.510-0.962，P=0.028)；與基因型為的144563CC的個體相比較，基因型為144563CT和144563TT(或攜帶144563T等位)的個體患

7、高血壓病的風險顯著增加(OR=1.474，95％可信區(qū)間：1.103-1.969，P=0.009)。④病例和對照組DDAH1 C143611G和C144563T兩個SNP位點的組合基因型分布存在顯著的差異(x2=18.63，P=0.017)，主要表現為病例組143611CC/144563TC和143611CC/144563TT基因型頻率顯著高于對照組(x2=7.604，P=0.006).Logistic回歸分析結果顯示，與其他基因型組合

8、相比較，基因型為143611CC同時144563位攜帶T等位的個體患高血壓病的風險顯著增加(OR=1.792，95％CI：1.263-2.548，P=0.001)。⑤高血壓病患者和對照組人群血漿ADMA濃度分別為0.766±0.230 μmol/L和0.503±0.181μmol/L，兩組人群間血漿ADMA濃度存在顯著的差異(P<0.001)。⑥在對照人群中，攜帶DDAH1 143611G等位的個體血漿ADMA濃度顯著增高(P=0.01

9、0)，而攜帶144563T等位的個體血漿中ADMA濃度明顯降低(P=0.041)：對兩個SNP位點進行聯合分析的結果發(fā)現，基因型為143611CC同時144563位攜帶T等位的個體血漿ADMA濃度顯著低于其他基因型組合的個體(P=0.015)。⑦在高血壓病例中，DDAH1 C143611G和C144563T兩個SNP位點各基因型間血漿ADMA的濃度無顯著差異，但在有冠心病病史的患者中，基因型為143611CC/144563TT(n=5)

10、、143611CC/144563TC(n=17)和其他基因型組合(n=30)的個體血漿ADMA的濃度存在顯著差異，分別為1.107±0.257μmol/L、0.751±0.193μmol/L和0.729±0.165μmol/L(P=0.0004)。結論：①DDAHI基因的遺傳多態(tài)性與中國人原發(fā)性高血壓的易感性相關，DDAHI基因是原發(fā)性高血壓重要的易感基因；②高血壓病患者血漿ADMA的水平升高；③DDAH1基因C143611G和C144