硫化氫對(duì)大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞的舒張作用及機(jī)制的研究.pdf

1、目的：本課題旨在研究硫化氫(H2S)對(duì)離體單個(gè)結(jié)腸平滑肌細(xì)胞舒縮作用的影響；并進(jìn)一步研究H2S對(duì)結(jié)腸平滑肌細(xì)胞的舒縮作用是否通過(guò)改變ATP敏感鉀離子通道(KATP通道)的活性引起，從而探討H2S調(diào)節(jié)胃腸道動(dòng)力的機(jī)制。 方法：制備Wister大鼠單個(gè)結(jié)腸平滑肌細(xì)胞懸液。用H2S供體硫氫化鈉(NaSH)，NaSH+KATP通道抑制劑格列本脲(Gli)，KATP通道開(kāi)放劑吡那地爾(Pin)處理大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞，在倒置相差顯微鏡下觀察

2、，應(yīng)用圖象分析系統(tǒng)測(cè)量細(xì)胞長(zhǎng)軸的長(zhǎng)度，觀察藥物對(duì)細(xì)胞舒縮作用的影響。 結(jié)果：1.NaSH組作用時(shí)間為60s組的細(xì)胞平均長(zhǎng)度大于作用時(shí)間為30、120s組(P<0.05)并大于對(duì)照組(P<0.05)，其細(xì)胞舒張量值為20.48％。故后期實(shí)驗(yàn)中均選用60s作為藥物反應(yīng)時(shí)間。2.1×10-5、1×10-4和1×10-3mol/LNaSH組的細(xì)胞平均長(zhǎng)度均大于對(duì)照組(P<0.05)。其中1×10-4和1×10-3mol/L，NaSH組的

3、細(xì)胞平均長(zhǎng)度大于1×10-5mol/LNaSH組(P<0.05)：而1×104和1×10-3mol/LNaSH組之間的細(xì)胞平均長(zhǎng)度無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。3.NaSH+1×10-6mol/LGli，NaSH+1×10-5mol/LGli，NaSH+1×10-4mol/LGli和NaSH+1×10-3mol/ILGli4組的細(xì)胞平均長(zhǎng)度均小于NaSH+PBS組(P<0.05)，大于PBS+PBS組(對(duì)照組)(P<0.05)。其中Gl

4、i在1×10-6mol/L至1×10-4mol/L范圍內(nèi)其濃度與細(xì)胞平均長(zhǎng)度呈負(fù)相關(guān)趨勢(shì)，即隨著Gli濃度增加細(xì)胞平均長(zhǎng)度逐漸減少(P<0.05)；而NaSH+1×10-4mol/LGli和NaSH+1×10-3mol/LGli組之間的細(xì)胞平均長(zhǎng)度無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。4.1×10-6、1×10-5、1×10-4mol/LPin組的細(xì)胞平均長(zhǎng)度較對(duì)照組增加(P<0.01)，且隨著Pin濃度的增加，細(xì)胞平均長(zhǎng)度增加。 結(jié)論

5、：1.NaSH可以產(chǎn)生細(xì)胞舒張作用。在作用時(shí)間為60s時(shí)，其舒張作用最明顯；且NaSH的細(xì)胞舒張作用具有一定的劑量依賴(lài)性，即在一定劑量范圍內(nèi)其舒張作用隨濃度的增加而增強(qiáng)。2.Gli可以減弱NaSH(1×10-4mol/L)對(duì)細(xì)胞的舒張作用，并具有一定的劑量依賴(lài)性；但Gli不能完全阻斷NaSH的細(xì)胞舒張作用。3.Pin可以和NaSH一樣產(chǎn)生細(xì)胞舒張作用。4.本研究提示H2S可以對(duì)Wister大鼠離體單個(gè)結(jié)腸平滑肌細(xì)胞產(chǎn)生舒張作用，激活KA