松乳菇菌絲體分離、培養(yǎng)及其rDNAITS分子鑒定研究.pdf

1、松乳菇(Lactariusdeliciosus)，系紅菇科、乳菇屬真菌。其味道鮮美獨特，營養(yǎng)豐富，可食用也可藥用，市場上十分走俏。它與松樹共生，是一種菌根食用菌，因其有特殊的生態(tài)條件、營養(yǎng)方式和子實體分化條件，目前尚不能人工栽培，市場供應全靠野生采集，由于野生松乳菇過度采摘，導致產(chǎn)地自然資源嚴重破壞，產(chǎn)量逐漸減少。為了保護食用菌資源多樣性和滿足消費者對食用菌的需求，松乳菇的人工栽培成為目前國內(nèi)外研究的熱點。松乳菇人工栽培的關鍵問題是生產(chǎn)

2、出大量的菌絲體，故培養(yǎng)食用菌菌絲體是開發(fā)利用菌根真菌的先決條件。本論文對野生松乳菇的組織分離、菌絲的純培養(yǎng)和菌絲的分子鑒定進行了研究。主要研究結(jié)果如下： 1.松乳菇的菌種可通過松乳菇組織分離或孢子分離得到。本實驗采用組織分離獲得松乳菇的純菌種，但其分離成功率低，易污染，可采用以下幾個要點進行組織分離：①種菇須選用生長健壯，菇形正常，菌柄粗壯實心。②種菇采集后應立即進行分離，如上午采集的種菇，中午至下午進行分離為好，不要過夜。③熟

3、練的操作。 2.通過松乳菇菌絲體在固體平板培養(yǎng)基上的培養(yǎng)觀察，結(jié)果表明松乳菇菌絲體生長的適宜條件是：菌絲在PDA或PDA綜合培養(yǎng)基上生長較好，最適生長溫度為26℃，培養(yǎng)基最適pH值為5.2，對碳源中果糖利用較好，對氮源中NH4NO3利用較好。 3.針對松乳菇分離菌絲體目前難出菇的現(xiàn)實，運用分子生物學技術，對松乳菇組織分離菌株rDNAITS區(qū)域進行測序分析，通過和GenBank中已知乳菇屬的種進行序列比對，構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，