實時熒光定量RT-PCR檢測進展期胃下部癌MMP-7和TIMP-1 mRNA表達及其意義.pdf

1、胃癌是世界上最高發(fā)的惡性腫瘤之一，其死亡率在我國居各種惡性腫瘤之首。根治手術是胃癌目前的主要治療手段，術后5年生存率約為40％。復發(fā)和轉移是胃癌患者手術治療失敗的主要原因，也是胃癌病死率高居不下的首要因素。研究胃癌侵襲轉移的相關因素，尋求能準確判斷胃癌侵襲轉移的分子生物學標志物，探討幽門輪的防癌屏障作用的分子機制，成為胃癌研究工作的重點。
　　 腫瘤侵襲轉移過程的一個重要環(huán)節(jié)是腫瘤細胞分泌多種蛋白水解酶對細胞外基質（ECM）和基

2、底膜的降解，在此環(huán)節(jié)中基質金屬蛋白酶（MMPs）和金屬蛋白酶抑制劑（TIMPs）起到重要作用。MMP-7和TIMP-1分別是基質金屬蛋白酶家族和金屬蛋白酶抑制劑家族中的重要一員，其在腫瘤侵襲轉移過程中發(fā)揮重要作用。
　　 目的：
　　 探討人胃癌腫瘤組織、幽門輪組織、十二指腸組織中MMP-7和TIMP-1 mRNA的表達及其與進展期下部胃癌生物學行為的關系；探討幽門輪在防癌屏障作用中可能的分子機制。
　　 材料與

3、方法：
　　 一、標本收集
　　 收集中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院腫瘤外科2008～2009年間52例遠端胃癌患者手術標本，各取腫瘤組織、幽門輪組織52例，十二指腸組織23例，并取相應癌旁正常組織52例作對照，所有患者術前均未進行過化療或放療，所有病例術后均經(jīng)病理證實為進展期遠端胃癌。
　　 二、實驗方法
　　 將幽門輪及十二指腸組織塊石蠟包埋切片后行HE染色，確定十二指腸及幽門輪侵襲情況。Trizol法提取

4、所有標本總RNA，應用反轉錄試劑盒將總RNA逆轉錄為cDNA，Real-time PCR擴增各個分子指標，以β-actin做內(nèi)對照。Rotor-Gene6000實時定量系統(tǒng)分析各基因表達情況。全部數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS16.0統(tǒng)計學軟件處理，△CT值以mean±SD表示，進行兩獨立樣本的t檢驗，組間率的比較采用X2檢驗，P<0.05（雙尾）有統(tǒng)計學意義。
　　 結果：
　　 1、MMP-7在胃癌組織中表達平均高于癌旁正常組織2.

5、23倍（P<0.05），在幽門輪及十二指腸組織中表達平均較癌旁正常組織降低0.47倍和0.29倍（P<0.05）。
　　 2、TIMP-1在胃癌組織中表達平均較癌旁正常組織降低0.50倍（P<0.05），在幽門輪及十二指腸組織中表達較癌旁正常組織無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。
　　 3、MMP-7、TIMP-1在胃癌組織中表達增強與降低比率均與淋巴結轉移、浸潤深度、組織分化程度、遠端侵襲相關（均P<0.05），與腫瘤大小

6、、生長方式、大體分型無關（均P>0.05）。
　　 4、MMP-7在幽門輪組織中表達與幽門輪侵襲相關（P<0.05），而TIMP-1在幽門輪組織中表達與幽門輪侵襲無相關性（P>0.05）。
　　 結論：
　　 1、MMP-7在胃癌腫瘤組織中高表達，在幽門輪及十二指腸組織中低表達，且其表達與浸潤深度、淋巴結轉移、組織分化程度及遠端侵襲密切相關，提示其表達在胃癌的發(fā)生發(fā)展和侵襲轉移過程中起到促進作用。