新型非環(huán)核苷膦酸類抗HBV前藥合成、藥理活性及主客體化學(xué)研究.pdf

1、阿德福韋酯(Adefovir Dipivoxil)是上市的第一個(gè)非環(huán)核苷膦酸酯類抗HBV藥物，臨床研究表明該藥物能明顯改善乙肝患者肝臟組織學(xué)性質(zhì)，降低血清HBV-DNA及轉(zhuǎn)氨酶水平,特別是能有效抑制對(duì)拉米夫定、恩曲他濱、泛昔洛韋等產(chǎn)生耐藥性的乙肝病毒株。然而該藥物在臨床使用過(guò)程中出現(xiàn)的劑量依賴性腎毒性限制了其臨床應(yīng)用，使得尋找性能更優(yōu)的新型非環(huán)核苷膦酸類前藥成為抗HBV的研究重點(diǎn)。
　　本論文在前期研究中發(fā)現(xiàn)阿德福韋雙 L-氨基酸

2、酯前藥能增強(qiáng)原藥阿德福韋抗HBV活性、降低細(xì)胞毒性的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步以其為先導(dǎo)化合物，根據(jù)病理與藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)非甾體抗炎藥能有效抑制有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)體1（hOAT1）介導(dǎo)的阿德福韋膦酸雙負(fù)離子跨腎小管基底膜轉(zhuǎn)運(yùn)從而降低后者腎毒性的研究結(jié)果，采用拼合設(shè)計(jì)原理在先導(dǎo)化合物膦酸基上引入非甾體抗炎藥物結(jié)構(gòu)片段設(shè)計(jì)、合成阿德福韋單 L-氨基酸酯，單非甾體藥物羧酸酯前藥,以期發(fā)現(xiàn)具有較高抗病毒活性、較低腎毒性的抗HBV阿德福韋前藥。
　　本論文中

3、我們按照以下步驟合成目標(biāo)化合物，首先在DCC、DMAP存在下以N-Boc L-氨基酸、非甾體抗炎藥物（布洛芬、氟比羅芬、酮洛芬），2-溴乙醇與3-溴-1-丙醇為原料制備N-Boc L-氨基酸2-溴乙基酯與3-溴丙基酯片段以及非甾體抗炎藥的2-溴乙基酯，3-溴丙基酯片段；而后通過(guò)以上述結(jié)構(gòu)片段與阿德福韋在N,N′-二環(huán)己基-4-嗎啉基-咪(DCMC)的存在下通過(guò)“一鍋合成法（One Pot Synthesis）”縮合，后經(jīng)85％磷酸脫去N

4、-叔丁氧羰基制備了26個(gè)阿德福韋單L-氨基酸酯，單羧酸酯目標(biāo)化合物，結(jié)構(gòu)確證表明所得產(chǎn)物與設(shè)計(jì)目標(biāo)化合物結(jié)構(gòu)一致。
　　本論文分別采用HK-2與HepG22.2.15細(xì)胞模型進(jìn)行化合物體外腎細(xì)胞毒性與抗HBV活性評(píng)價(jià)?？笻BV活性結(jié)果表明化合物均具有HBV-DNA抑制活性而且細(xì)胞毒性（CC5036.61~447μmol.L-1）明顯低于陽(yáng)性對(duì)照藥物Adefovir dipivoxil（CC501.23μmol.L-1）；腎細(xì)胞毒性

5、測(cè)試結(jié)果表明化合物作用HK-2細(xì)胞24h及48h后，細(xì)胞活力與LDH的釋放率均優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照Adefovir dipivoxil?？笻BV活性與HK-2細(xì)胞毒性評(píng)價(jià)結(jié)果表明，采用阿德福韋單L-氨基酸丙酯、單非甾體抗炎藥羧酸丙酯前藥設(shè)計(jì)策略獲得的化合物具有抗HBV活性并且細(xì)胞毒性明顯低于Adefovir dipivoxil，同時(shí)其腎細(xì)胞毒性明顯低于Adefovir dipivoxil，表明化合物有進(jìn)一步研究?jī)r(jià)值。
　　此外，本論文研究

6、了阿德福韋雙 L-苯丙氨酸丙酯（FH-1）與瓜環(huán)(cucurbit[n]uril，n=6-8)的主客體相互作用機(jī)理，通過(guò)1H NMR、熒光光譜、紅外光譜（FT-IR）分析手段對(duì)主客體包合物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)表征，并對(duì)包合物的吸濕穩(wěn)定性以及抗病毒活性進(jìn)行了考察。結(jié)果證實(shí)了阿德福韋雙 L-苯丙氨酸丙酯與瓜環(huán)之間存在主客體包合作用關(guān)系，包合物吸濕穩(wěn)定性與抗HBV活性明顯優(yōu)于客體分子。這些研究結(jié)果為將人工合成受體作用模式引入阿德福韋雙 L-氨基酸酯類衍