HCC患者PBMCs中HBV逆轉錄酶P基因的表達與X、P基因整合的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:研究在原發(fā)性肝細胞癌(HCC)患者外周血單個核細胞(PBMCs)中乙型肝炎病毒(HBV)DNA多聚酶/逆轉錄酶P基因的表達與X、P基因整合的關系,闡明HBV的整合機制以及肝細胞癌的發(fā)病機制.方法:選擇HBsAg陽性的原發(fā)性肝癌病人40例,其中Ⅰ期患者4例,Ⅱ期14例,Ⅲ期22例;血清HBVDNA陽性7例,HBVDNA陰性33例;另選擇5例HBsAg陰性的原發(fā)性肝癌患者和5例HBsAg陰性的健康體檢者作陰性對照和健康對照.提取全血中

2、PBMCs,分別進行PBMCs中細胞基因組總DNA和總RNA提取,其中總RNA提取后經(jīng)無RNA酶的DNA酶I消化去除殘存的基因組DNA后逆轉錄合成cDNA.設計并合成HBV的P基因及X基因引物P1 P2及X1 X2,以逆轉錄合成的cDNA為模板,用編碼DNA多聚酶/逆轉錄酶的P基因引物行RT-PCR擴增,以檢測HBV逆轉錄酶P基因在PBMCs中的表達情況;以提取的總DNA為模板,分刖用P基因及X基因引物行PCR擴增,以檢測P、X基因在P

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