直腸癌抑制性消減雜交片斷在直腸癌組織及正常直腸組織差異表達(dá)分析.pdf

1、目的：結(jié)直腸癌(colorectalcancer，CRC)是常見的惡性惡性腫瘤，其發(fā)生發(fā)展過程涉及多個(gè)癌基因的激活和抑癌基因的失活及錯(cuò)配修復(fù)基因的突變。 我們利用抑制性消減雜交結(jié)合cDNA芯片技術(shù)，篩選出86個(gè)差異表達(dá)的基因片段，選擇其中四個(gè)基因，分別為heatshock10kDaprotein1(HSPE1HSP10)基因、SRY-box9(SOX9)基因、polymericimmunoglobulinreceptor(PIG

2、R)和真核細(xì)胞延長因子-1delta(eukaryotictranslationelongationfactor1delta，EEF1-delta)基因。HSPE1與heatshock60kDaprotein1(HSPD1)協(xié)同，幫助HSPD1蛋白行使其功能，參與蛋白質(zhì)的折疊與伸展，多聚復(fù)合體的組裝，發(fā)揮其調(diào)節(jié)靶蛋白的作用。SOX9編碼的蛋白質(zhì)與帶HMG-box的其他DNA結(jié)合蛋白一起識(shí)別CCTTGAG序列，屬于轉(zhuǎn)錄因子。在軟骨細(xì)胞分化

3、中與類固醇生成因子1一起調(diào)節(jié)anti-Muellerianhormone(AMH)基因的轉(zhuǎn)錄。SOX9蛋白缺乏導(dǎo)致長骨發(fā)育不全綜合癥，并時(shí)常伴有性別反轉(zhuǎn)。 PIGR在包括肝、乳腺等幾種腺上皮中表達(dá)。它調(diào)節(jié)細(xì)胞間多聚免疫球蛋白的細(xì)胞間轉(zhuǎn)運(yùn)，為免疫球蛋白超家族的一員，有5個(gè)與免疫球蛋白可變區(qū)相似的單位和1個(gè)跨膜區(qū)，這個(gè)跨膜區(qū)也與免疫球蛋白可變區(qū)相似。EEF1-delta基因編碼延長因子-1復(fù)合體的一個(gè)亞單位，在蛋白合成中的作用是將攜

4、帶氨基酸的tRNA在酶的作用下連接到核糖體上。這四個(gè)基因分別參與基因的轉(zhuǎn)錄，調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的各種活動(dòng)，參與機(jī)體免疫活動(dòng)。本文通過對(duì)這四個(gè)基因在直腸癌組織及正常直腸組織中表達(dá)差異的研究，為結(jié)直腸癌發(fā)病機(jī)制的研究提供新思路，亦為研究結(jié)直腸癌的發(fā)病機(jī)理提供參考資料。 方法：采用RT-PCR及Real-timePCR檢測(cè)直腸癌患者癌組織及對(duì)應(yīng)正常直腸組織中HSPE1、SOX9及PIGR基因的表達(dá)。采用Real-timePCR及狹線雜交

5、檢測(cè)EEF1-delta在直腸癌組織及正常直腸組織中的表達(dá)。 結(jié)果：1.Real-timePCR結(jié)果顯示HSPE1及EEF1-delta在癌組織中的表達(dá)高于正常直腸組織；而SOX9及PIGR在癌組織中的表達(dá)低于正常直腸組織，差異均有顯著性(P＜0.05) 2.RT-PCR結(jié)果顯示HSPE1基因在癌組織中表達(dá)升高，PIGR基因在癌組織中表達(dá)降低，SOX9基因在癌組織及正常組織中表達(dá)無差異。 3.狹線雜交結(jié)果顯示直腸