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文檔簡介
1、目的:探討白介素23(IL-23),白介素17(IL-17)在小鼠皮膚移植后不同免疫狀態(tài)下外周循環(huán)血漿中及移植物組織病理的變化;了解IL-23、IL-17與調(diào)節(jié)T細(xì)胞(Treg cell)在不同免疫狀態(tài)下的相互作用;探討IL-23/IL-17通路在小鼠皮膚移植后的免疫調(diào)節(jié)作用。為臨床移植后排斥反應(yīng)的預(yù)防、診斷和治療轉(zhuǎn)歸及免疫耐受提供理論指導(dǎo)。
方法:小鼠皮膚移植動物模型的建立(n=10):第1組、同種同基因移植組(BALB
2、/c→BALB/c)、第2組、同種異基因移植組(C57BL/6→BALB/c),第3組、供體脾細(xì)胞輸注組(C57BL/6→BALB/c)。觀察三組不同時間移植皮瓣外觀變化及鏡下三組移植皮膚HE切片的病理改變;采用ELISA方法檢測小鼠血漿IL-17、IL-23的濃度;RT-PCR反應(yīng)檢測移植皮膚及脾臟的IL-23mRNA、IL-17mRNA的表達(dá);流式細(xì)胞儀檢測脾臟Treg細(xì)胞百分比。
結(jié)果:三組小鼠移植后大體外觀及HE染
3、色鏡下所見:同基因移植組小鼠移植皮術(shù)后皮片生長完好,無排斥反應(yīng)發(fā)生;異基因小鼠移植皮出現(xiàn)典型的急性排斥反應(yīng);術(shù)前輸注脾細(xì)胞異基因小鼠移植組,排斥反應(yīng)明顯減輕。
三組小鼠皮膚移植后,IL-17、IL-23及IL-23mRNA、IL-17mRNA術(shù)后第1天內(nèi)均表達(dá)升高,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);隨著移植時間的延長,2、3組IL-17、IL-23及IL-23mRNA、IL-17mRNA的表達(dá)明顯升高,與第1組相比差異有統(tǒng)
4、計(jì)學(xué)意義(P<0.01);2與3組術(shù)后3、5、7天的IL-23、IL-23mRNA的表達(dá)與1組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);2、3組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05):三組術(shù)后第3、5、7天的IL-17、IL-17mRNA表達(dá)結(jié)果顯示:1、3組與第2組之間相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01).1、3組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
流式細(xì)胞術(shù)檢測顯示:三組CD4+FoxP3+Treg細(xì)胞術(shù)后第1天占CD4+T
5、細(xì)胞的比例分別為(0.9±0.6)%、(0.7±0.5)%、(0.8±0.4)%,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。在皮膚移植術(shù)后第7天,第3組CD4+FoxP3+Treg占CD4+T細(xì)胞的比例高于2組,其分別為(5.1±2.8)%和(4.54±2.5)%,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.00);Th17/CD4+FoxP3+Treg比值在第2組中的表達(dá)高于第3組差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.00)。
結(jié)論:
(1)、
6、移植后早期發(fā)生急性排斥反應(yīng)時,IL-23,IL-17及IL-23mRNA、IL-17mRNA處于高表達(dá)水平;無排斥反應(yīng)條件下IL-23、IL-17及IL-23mRNA、IL-17mRNA早期升高,隨著炎癥減輕其數(shù)值降低,IL-23,IL-17可作為預(yù)測和糾正排斥反應(yīng)發(fā)生的觀察指標(biāo)。
(2)、在急性排斥反應(yīng)模型中IL-23與IL-17呈正相關(guān)性表達(dá),IL-23作為IL-17的上游因子,對Th17細(xì)胞的成熟及其IL-17分泌有
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