IFN-β基因修飾的人骨髓間充質干細胞抗前列腺癌細胞系PC-3效應的實驗研究.pdf

1、目的：觀察人類β干擾素(IFN-β)基因轉染的人骨髓間充質干細胞(hMSCs)對前列腺癌細胞PC-3體外生長情況的影響，初步探討人骨髓間充質干細胞作為基因運載細胞治療前列腺癌的可行性。 方法：構建人類β干擾素基因的真核表達質粒pCDNA3.1-IFN—β，通過脂質體介導，體外轉染人骨髓間充質于細胞。將成功表達β干擾素的IFN—β—hMSCs與前列腺癌細胞系PC-3在Transwell培養(yǎng)體系中體外共培養(yǎng)，分別于共培養(yǎng)后第1天、第

2、3天、第5天對前列腺癌細胞株PC-3進行胎盼藍染色，計數存活細胞數目，流式細胞儀分析PC-3凋亡情況。同時保留部分細胞上清，ELISA法分析IFN-β的表達情況。 結果：經IFN-β基因修飾的hMSCs在體外實驗中能有效地抑制前列腺癌細胞生長，促進其凋亡。共培養(yǎng)后第5天，IFN-β-hMSCs與PC-3共培養(yǎng)組的存活PC-3數量由共培養(yǎng)前的0.5×106減少到(0.42±0.032)×106，而各對照組(PC-3單獨培養(yǎng)組、濃度

3、為1000IU/ml人工重組IFN-β作用下的PC-3單獨培養(yǎng)組、hMSCs與PC-3共培養(yǎng)組、P—hMSCs與PC-3共培養(yǎng)組)前列腺癌細胞數量均有不同程度的增長，實驗組與各對照組之間比較差異存在統(tǒng)計學意義(P＜0.001)。流式細胞儀分析前列腺癌細胞的凋亡率為40.29％。ELISA分析細胞上清：在轉染后4小時，IFN—β-hMSCs即可分泌表達出IFN-β，24小時到高峰(3～4×103IU/105個細胞)，72小時后表達量有所下