凋亡抑制蛋白基因XIAP在卵巢上皮性癌中的研究.pdf

1、卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)三大惡性腫瘤之一，發(fā)病率約占5～7/10萬。因為其起病隱匿，60～70﹪的病人表現(xiàn)為分期較晚，需要接受較大的手術、精細而頻繁復雜的輔助化療，5年生存率始終在30﹪左右。卵巢癌已經(jīng)成為嚴重威脅女性生命和健康的主要腫瘤。而卵巢上皮性癌則在所有的婦科惡性腫瘤中具有較高的病死率，局部浸潤和轉移則是致病人死亡的主要原因。因此探索其浸潤轉移機制，尋找有價值的可以預測轉移及指導臨床治療的生物學指標成了卵巢腫瘤研究的熱點。

2、1996年， Liston等<'[1]>運用Southern雜交和PCR技術在人胚胎腦組織中克隆出凋亡抑制蛋白(Inhibitotr of apoptosis proteins，IAPs)家族的新基因。該基因定位于Xq25，故命名為X連鎖的凋亡抑制蛋白 (X-linkedinhibitor of apoptosis protein，XIAP)基因。作為IAPs的一名新成員，XIAP基因的凋亡抑制作用在多種腫瘤組織中已經(jīng)得到證實。大量研究

3、表明，XIAP的過表達參與腫瘤的進展，與腫瘤的預后密切相關。本文旨在探討：1、XIAP基因在人卵巢上皮性癌組織中的表達特點及其表達水平的變化與卵巢上皮性癌臨床、病理等因素的關系。通過統(tǒng)計分析，篩選出與卵巢上皮性癌轉移相關的危險因素，從而為臨床治療、隨診以及預后判斷提供理論依據(jù)。2、通過觀察化療藥物紫杉醇、順鉑作用后卵巢上皮性癌細胞株3AO、SKOV3中XIAP基因表達的變化，為臨床卵巢上皮性癌侵襲轉移的治療和進一步的實驗研究奠定理論基礎

4、。 第一部分 目的：通過對不同年齡、臨床分期、組織學分級、病理類型、淋巴結(或遠處)轉移以及有無癌性腹水(或腹腔沖洗液)的卵巢上皮性癌組織中XIAP基因表達進行研究，探討XIAP基因表達與其臨床病理各相關因素的相關性。 方法：采用逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)技術檢測50例卵巢上皮性癌標本及12例正常卵巢標本的卵巢組織中XIAP mRNA的表達，半定量分析電泳結果。卵巢上皮性癌與正常卵巢組織中XIAP基因表達

5、的關系采用x<'2>檢驗和Fisher’s精確概率檢驗進行統(tǒng)計學分析。XIAP基因表達水平與卵巢上皮性癌的臨床病理因素之間的關系采用單因素方差分析進行統(tǒng)計學分析。 結果：1、在12例正常卵巢組織標本中XIAP陽性表達率為13.3﹪， 50例卵巢上皮性癌標本中XIAP陽性表達率為74﹪，二者差異有顯著性(P<0.01)。2、不同臨床分期的腫瘤組織中XIAP基因表達陽性率之間的差異有顯著性，具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。3、腹水或

6、腹腔沖洗液查見癌細胞者XIAP的表達幾乎全為陽性，表達強度明顯高于腹水或腹腔沖洗液者未查見癌細胞者，分期晚者表達更強，統(tǒng)計學意義顯著(P<0.01)。4、高分化與低分化卵巢癌組織的XIAP基因表達無明顯差異(P>0.05)。 結論：1、卵巢上皮性癌組織中XIAP mRNA的表達強于正常卵巢組織。2、XIAP的高表達與卵巢癌的臨床分期呈正相關，與癌性腹水形成有明顯的相關性。3、檢測XIAP表達水平對早期診斷卵巢癌及判斷卵巢癌的臨床

7、進展有一定的參考價值。 第二部分 目的：探討XIAP基在卵巢癌細胞株SKOV3及3AO中的表達。研究紫杉醇、順鉑及二者聯(lián)合作用對人卵巢上皮性癌細胞株SK0v3及3AO的生長抑制作用，及其對SKOV3及3AO細胞株中xIAP基因表達的影響，并初步探討其作用機制。 方法：倒置顯微鏡下觀察SKOV3、3AO細胞在不同濃度的各組化療藥物作用下形態(tài)學的變化；采用RT—PCR和免疫組化SABC法檢測SKov3、3AO細胞中X

8、IAP mRNA和蛋白的表達，及一定濃度梯度的化療藥物(順鉑、紫杉醇、順鉑+紫杉醇)作用后細胞內(nèi)XIAP表達的變化，MTT法測定藥物作用后細胞的存活率，并分析XIAP的表達與細胞生存率的關系。 結果：1、XIAP mRNA和蛋白在SKOV3細胞中的表達高于3AO細胞，同濃度同種藥物作用下SKOV3細胞存活率及XIAP蛋白表達高3AO(P<0.05)，1μ/ml順鉑對細胞幾乎無影響，同濃度紫杉醇作用強于順鉑(P<0.05)，紫杉醇

9、與順鉑聯(lián)用作用強于兩種藥物單用(P<0.05)；隨藥物濃度增高，細胞XIAPmRNA及蛋白表達逐漸減少，細胞存活率逐漸降低，XIAP的表達與細胞存活率有線性回歸及相關關系(P<0.05)。2、MTT檢測結果顯示紫杉醇、順鉑對SKOV3/3A0細胞的生長抑制作用呈明顯的劑量依賴關系，而聯(lián)合用藥對SKOV3/3A0細胞的生長抑制作用較單獨作用顯著。 結論：1、紫杉醇、順鉑聯(lián)合作用可增加對卵巢上皮性癌SKOV3/3AO細胞的生長抑制率