BRAFV600E基因突變與NIS啟動子甲基化在甲狀腺乳頭狀癌中的研究.pdf

1、目的:研究甲狀腺乳頭狀癌(PTC)中BRAFV600E基因突變陽性表達(dá)與甲狀腺鈉/碘同向轉(zhuǎn)運(yùn)體(NIS)啟動子甲基化之間的聯(lián)系，為臨床治療甲狀腺癌提供理論依據(jù)。
　　方法:1，實(shí)驗(yàn)對象:收集2012年1月至2012年12月中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院病理科石蠟切片標(biāo)本共74例，按實(shí)驗(yàn)要求分為:實(shí)驗(yàn)組55例（甲狀腺乳頭狀癌組織），正常組19例（甲狀腺腺瘤旁正常組織）。2，實(shí)驗(yàn)方法:(1)提取石蠟組織標(biāo)本DNA;(2)運(yùn)用PCR技術(shù)對BRAFV

2、600E基因進(jìn)行目的基因擴(kuò)增，瓊脂糖凝膠電泳檢測，所得陽性條帶直接測序，以此研究BRAFV600E基因突變在甲狀腺乳頭狀癌標(biāo)本中分布情況;(3)在所測BRAFV600E基因突變陽性標(biāo)本中運(yùn)用甲基化特異性PCR(MSP)技術(shù)對其DNA進(jìn)行NIS啟動子目的基因擴(kuò)增，瓊脂糖凝膠電泳檢測，所得陽性條帶直接測序，以此研究NIS啟動子甲基化在BRAFV600E突變陽性標(biāo)本中的分布情況，并分析BRAFV600E基因突變與NIS啟動子甲基化在甲狀腺乳頭

3、狀癌中的聯(lián)系。
　　結(jié)果:1、在55例甲狀腺乳頭狀癌標(biāo)本中檢出35例標(biāo)本呈現(xiàn)BRAFV600E突變陽性表達(dá)(63.64％)，BRAFV600E突變呈陰性結(jié)果的有20例(36.36％)，19例正常組中無BRAFV600E基因突變檢出，將數(shù)據(jù)運(yùn)用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，兩者組間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，(P＜0.01);2、在BRAFV600E基因突變陽性表達(dá)的35例標(biāo)本中共檢出NIS基因啟動子甲基化陽性表達(dá)7例(20％)，在所有74例實(shí)

4、驗(yàn)對象余下的39例標(biāo)本中均未檢出NIS基因啟動子甲基化陽性表達(dá)，其NIS基因啟動子甲基化檢出情況經(jīng)SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，結(jié)果顯示無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，(P＞0.05);3、BRAFV600E基因突變及NIS基因啟動子甲基化與患者相關(guān)臨床資料之間進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，發(fā)現(xiàn)二者均與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移存在聯(lián)系，而與其他相關(guān)臨床數(shù)據(jù)無明顯關(guān)聯(lián);4、將BRAFV600E基因突變檢出情況數(shù)據(jù)同NIS基因啟動子甲基化檢出情況數(shù)據(jù)運(yùn)用四格表確切概率法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析得出