甲狀腺乳頭狀癌組織及外周血TSHR、TSHR-mRNA的表達(dá)與BRAFV600E基因突變的關(guān)系研究.pdf

1、目的:
　　探討人甲狀腺乳頭癌組織及外周血中 TSHR蛋白、TSHR-mRNA的表達(dá)與BRAFV600E基因突變的關(guān)系。
　　方法:
　　收集122例甲狀腺乳頭狀癌患者的正常對(duì)照甲狀腺及其腫瘤組織，對(duì)入組所有患者的腫瘤組織進(jìn)行BRAF基因V600 E點(diǎn)突變檢測(cè)（PCR法）；應(yīng)用“免疫組化”法檢測(cè)入組所有甲狀腺乳頭狀癌患者組織標(biāo)本中TSHR蛋白的表達(dá)情況；隨機(jī)選擇BRAF V600E基因突變組、BRAF V600E基因野

2、生組及正常對(duì)照甲狀腺組織各20例，應(yīng)用“Western-blot”方法對(duì)免疫組化結(jié)論進(jìn)行驗(yàn)證；進(jìn)一步應(yīng)用“RT-PCR”方法檢測(cè)BRAF V600E基因突變組、BRAFV600E基因野生組及正常對(duì)照甲狀腺組織（各10例）中TSHR-mRNA的相對(duì)表達(dá)量；再收集70例甲狀腺乳頭狀癌患者及34例甲狀腺良性疾病患者手術(shù)前和手術(shù)后外周血及11例健康志愿者的外周血全血樣本，應(yīng)用RT-PCR法檢測(cè)入組患者外周血中TSHR-mRNA表達(dá)水平；應(yīng)用SP

3、SS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析甲狀腺乳頭狀癌組織及外周血中TSHR及其 mRNA的表達(dá)與 BRAFV600E基因突變的關(guān)系。
　　結(jié)果:
　　甲狀腺乳頭狀癌組織中TSHR蛋白及TSHR-mRNA的表達(dá)水平均較正常對(duì)照組明顯降低，且在甲狀腺乳頭狀癌患者中，BRAF V600E基因突變型者較 BRAF V600E基因野生型者的TSHR蛋白及TSHR-mRNA的表達(dá)水平也明顯降低；在甲狀腺乳頭狀癌患者外周血中，術(shù)前 TSHR-mRNA

4、表達(dá)水平顯著高于甲狀腺良性病變組及健康對(duì)照組，且在手術(shù)后1天降至正常水平；在不同BRAFV600E基因型的甲狀腺乳頭狀癌患者中 BRAFV600E基因突變型患者術(shù)前外周血 TSHR-mRNA水平顯著高于BRAFV600E基因未突變者。
　　結(jié)論:
　　BRAFV600E基因突變影響甲狀腺乳頭狀癌TSHR的表達(dá)，使腫瘤組織中TSHR蛋白及其 mRN A表達(dá)水平下調(diào)；TSHR-mRNA作為甲狀腺乳頭狀癌患者循環(huán)腫瘤標(biāo)志物，其釋放