TLR2和TLR4在實驗性末端回腸炎發(fā)病過程中的變化及意義.pdf

1、目的：本研究擬通過回腸-盲腸側(cè)側(cè)吻合術(shù)建立大鼠實驗性末端回腸炎(Experimental Terminal Ileum, ETI)動物模型,觀察發(fā)病過程中末端回腸腸上皮細(xì)胞Toll樣受體(Toll-like receptor, TLR)2和Toll樣受體4的表達(dá)情況,探討TLR2及TLR4在發(fā)病過程中的作用,對進一步認(rèn)識末端回腸炎的發(fā)病機制有重要意義。
　　方法：清潔級雄性 SD大鼠,共60只,隨機分為造模組、縫線組、對照組,每組

2、20只。造模組行末端回腸-盲腸側(cè)側(cè)吻合術(shù),縫線組只在末端回腸作手術(shù)縫線,對照組只給予麻醉,不行手術(shù)。觀察術(shù)后動物的一般狀態(tài);術(shù)后第2周及第8周分批處死動物,收集距吻合口1-3cm處末端回腸組織,行蘇木素-伊紅(hematoxylin-eosin staining, HE)染色及免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry, IHC)染色(Elivison二步法),觀察末端回腸組織的病理學(xué)變化,進行大體肉眼及鏡下觀炎癥評分(in

3、flammation score, IC),觀察TLR2、TLR4的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1、實驗動物的一般狀況:術(shù)后3-5天,造模組與縫線組大鼠一般狀況均較前差,其中以體重下降最明顯,此時兩組與對照組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。造模組術(shù)后2周開始恢復(fù),3周之前較其他兩組恢復(fù)慢,縫線組于術(shù)后7-10天便恢復(fù),4周后,各組各時期的體重下降差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。各組死亡率無顯著差異(P>0.05)。

4、
　　2、末端回腸組織大體肉眼觀炎癥評分:2周時造模組與縫線組末端回腸大體肉眼觀均出現(xiàn)急性炎癥表現(xiàn),二組評分比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),兩組與對照組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。8周時,造模組評分較縫線組明顯升高,兩組評分比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),而此時縫線組與正常對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　3、末端回腸組織鏡下觀炎癥評分:2周時造模組與縫線組末端回腸鏡下觀均出現(xiàn)急性炎癥

5、表現(xiàn),二組評分比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),兩組與對照組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。8周時,造模組評分較縫線組明顯升高,兩組評分比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),而此時縫線組與正常對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。造模組2至8周大體肉眼觀及鏡下觀炎癥評分升高趨勢一致。
　　4、末端回腸組織TLR2的表達(dá)情況:2周時,造模組、縫線組、對照組大鼠末端回腸粘膜腸上皮細(xì)胞TLR2表達(dá)率分別為75.0％,6

6、6.7%,10.0%,8周時,三組大鼠末端回腸粘膜腸上皮細(xì)胞TLR2表達(dá)率分別為100.0%,40.0%,20.0%,且造模組表達(dá)率較其余兩組均高,三組進行比較,總體來說差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。2周時,造模組、縫線組TLR2平均吸光度(A)值均較對照組高,但兩組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),兩組與對照組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義( P<0.05)。8周時,造模組A值較前有所升高,但縫線組較前明顯降低,兩組評分比較差異有統(tǒng)計

7、學(xué)意義(P<0.05),而此時縫線組與正常對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　5、末端回腸組織 TLR4的表達(dá)情況:2周時,造模組、縫線組、對照組大鼠末端回腸粘膜腸上皮細(xì)胞TLR4表達(dá)率分別為87.5%,77.8%,20.0%,8周時,三組大鼠末端回腸粘膜腸上皮細(xì)胞TLR4表達(dá)率分別為100.0%,50.0%,20.0%,且造模組表達(dá)率較其余兩組均高,三組進行比較,總體來說差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。2周時,造

8、模組、縫線組TLR4平均吸光度(A)值均較對照組高,但兩組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),兩組與對照組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。8周時,造模組A值較前有所升高,但縫線組較前明顯降低,兩組評分比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),而此時縫線組與正常對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。造模組2至8周TLR2及TLR4表達(dá)強度一致。
　　結(jié)論：
　　1、TLR2、TLR4在實驗性末端回腸炎發(fā)病過程中表達(dá)