水稻SUV3-9H家族組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶的功能研究.pdf

1、水稻具有多個(gè)含有SET結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)(SET domain protein，SDP)，SET結(jié)構(gòu)域的命名來(lái)源于3個(gè)果蠅基因：SU(VAR)3-9，E(Z)和TRX，而SET結(jié)構(gòu)域是參與表觀遺傳過(guò)程(epigenetic processes)的組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶(histonemethyltransferases)的標(biāo)志結(jié)構(gòu)。Su(var)3-9家族的SDP專一甲基化組蛋白3第9位賴氨酸(H3K9)，從而導(dǎo)致基因沉默(gene silenc

2、ing)。我們克隆了3個(gè)Su(var)3-9家族的含有SET結(jié)構(gòu)域的基因(SET domain gene，SDG)：OsSET2、OsSE73和OsSET4，并對(duì)這三個(gè)基因編碼的蛋白質(zhì)的功能進(jìn)行了深入研究。利用大腸桿菌表達(dá)的OsSET2、OsSET3和OsSET4重組蛋白進(jìn)行的體外活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)證明OsSET3具有組蛋白H3K9的甲基轉(zhuǎn)移酶活性，而OsSET2和OsSET4不具有該活性。利用綠色熒光蛋白作為標(biāo)記，發(fā)現(xiàn)在細(xì)胞分裂間期，OsS

3、ET2定位于細(xì)胞核的核質(zhì)部分，OsSET3和OsSET4定位于染色質(zhì)的異染色質(zhì)區(qū)域；在細(xì)胞分裂的分裂期，OsSET3和OsSET4可以結(jié)合到染色體上，而OsSET2不能與染色體結(jié)合。OsSET2、OsSET3和OsSET4在擬南芥植株中的定位與在煙草BY2細(xì)胞中的定位一致。過(guò)量表達(dá)OsSET3會(huì)導(dǎo)致擬南芥的生長(zhǎng)受到抑制。我們的結(jié)果首次發(fā)現(xiàn)了水稻SUV3-9H家族具有H3K9甲基轉(zhuǎn)移酶活性的新成員OsSET3，為研究水稻SDP的功能進(jìn)行了