動態(tài)高壓微射流技術(shù)對荷葉多糖提取、結(jié)構(gòu)及抗氧化活性影響的研究.pdf

1、荷葉在我國廣泛種植，含有多種生物活性物質(zhì)，具有極高的開發(fā)價值。荷葉多糖是荷葉重要的功能成分，其顯著的生物學(xué)活性日益受到人們的關(guān)注。針對我國在荷葉多糖方面研究少、起步晚、技術(shù)落后的狀況，本課題以荷葉為原料，采用動態(tài)高壓微射流技術(shù)(DHPM)輔助法提取荷葉多糖，并與傳統(tǒng)熱水浸提法所得荷葉多糖作對比，探討了DHPM對荷葉多糖得率、初級結(jié)構(gòu)以及抗氧化活性等方面的影響。具體研究內(nèi)容及結(jié)論如下:
　　 1.分別對荷葉多糖的DHPM輔助提取法

2、和熱水浸提法進(jìn)行工藝優(yōu)化。結(jié)果如下:DHPM輔助提取法的最佳條件為處理壓力180MPa、液固比35∶1，溫度76℃、提取時間50min，在此條件下，荷葉多糖得率為6.31％;熱水浸提法的最佳條件為液固比35∶1，提取時間86min，溫度77℃，在此條件下，荷葉多糖的得率為2.95％。對比該兩種方法，發(fā)現(xiàn)兩種方法的提取溫度基本相同，僅相差1℃，DHPM輔助提取法和熱水浸提法所需提取時間分別為50min和86min，而DHPM輔助提取法的多

3、糖得率為熱水浸提法的2倍多，因此，DHPM輔助提取法是更為有效的提取方法。
　　 2.采用Sevage法脫蛋白，α-淀粉酶聯(lián)合糖化酶雙步酶解法除淀粉，DEAE-52Cellulose柱層析分離純化D-LLP和H-LLP。結(jié)果發(fā)現(xiàn)D-LLP和H-LLP都分別在0.1mol/LNaCl溶液和0.2mol/L NaCl溶液的洗脫下出現(xiàn)單一、對稱的洗脫峰，說明D-LLP和H-LLP經(jīng)DEAE-52 Cellulose柱層析后的兩個組份均

4、為酸性多糖。
　　 3.采用葡聚糖凝膠柱層析法和SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法檢測D-LLP-1和H-LLP-1的純度，D-LLP-1和H-LLP-1的葡聚糖凝膠柱層析的洗脫曲線均出現(xiàn)單一、對稱的吸收峰，電泳圖也均有單一條帶，說明D-LLP-1和H-LLP-1組分單一、純度較高。以紫外光譜、斐林試劑反應(yīng)、碘-碘化鉀的反應(yīng)以及三氯化鐵反應(yīng)檢測D-LLP-1和H-LLP-1的理化性質(zhì)，根據(jù)實驗結(jié)果，初步判定H-LLP-1和D-LLP-

5、1為無蛋白質(zhì)結(jié)合、不含還原糖及多酚類物質(zhì)的非淀粉多糖。
　　 4.D-LLP-1和H-LLP-1均含有鼠李糖、巖藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖，但每種單糖的含量都不相同。高效凝膠滲透色譜法測得D-LLP-1的分子量為549540Da，H-LLP-1的分子量為578096Da。D-LLP-1和H-LLP-1的紅外光譜說明它們的結(jié)構(gòu)差異不大，均為含吡喃環(huán)多糖。
　　 5.D-LLP-1和H-LLP-1的抗氧化實