新生大鼠缺氧缺血性腦病血清UCH-L1蛋白表達水平的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:本實驗通過制備7日齡SD大鼠缺氧缺血性腦損傷(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)模型,對血清中UCH-L1蛋白的濃度進行檢測,探討(1)血清UCH-L1蛋白在新生SD大鼠缺氧缺血性腦病早期診斷中的價值。(2)血清UCH-L1蛋白水平與腦損傷嚴重程度的關系,為臨床新生兒缺氧缺血性腦病的早期診斷和腦損傷評估提供實驗依據(jù)。
  方法:(1)7日齡SD大鼠168只,隨機分為3組:空白對照組,假手術

2、組及HIBD模型組,每一組56只;HIBD組又隨機分為7個亞組:6h組、12h組、24h組、48h組、72h組、96h組及7d組,每亞組8只。HIBD模型組采用改良Rice法制備HIBD模型。空白對照組及假手術組組內(nèi)分組同HIBD組。(2)實驗前后分別觀察運動行為學變化、行改良神經(jīng)功能缺失評分。(3)HIBD組于6h時全部先行取血一次,然后各組再按照相同時間點取血,留取腦組織,觀察腦組織形態(tài)學變化及腦組織病理學改變(HE染色)。(4)采

3、用ELISA法(雙抗夾心法)檢測血清中 UCH-L1表達水平的變化。
  結果:(1)運動行為學觀察空白對照組及假手術組無異常表現(xiàn);HIBD組在缺氧過程中出現(xiàn)嚴重的異常表現(xiàn)。(2)改良神經(jīng)功能缺失評分空白對照組及假手術組評分均為0;HIBD組在建模后評分均出現(xiàn)不同程度的變化:其中輕度損傷4.78±1.39(17只),中度損傷9.36±1.92(25只),重度損傷14.63±1.41(14只)。(3)腦組織大體形態(tài)學觀察空白對照組及

4、假手術組腦組織外觀正常。HIBD組建模后腦組織出現(xiàn)不同程度的水腫、液化、壞死改變。(4)腦組織HE染色鏡下觀察空白對照組及假手術組神經(jīng)元細胞未見異常。HIBD組建模后各時間點左側腦組織HE染色鏡下觀察神經(jīng)元細胞出現(xiàn)變性、壞死、凋亡,同時伴有神經(jīng)膠質(zhì)細胞的增生。(5)血清 UCH-L1蛋白水平各時間點統(tǒng)計學分析空白對照組組間比較血清UCH-L1蛋白濃度差異,P>0.05,無統(tǒng)計學意義。假手術組組間比較血清UCH-L1蛋白濃度差異,P>0.

5、05,無統(tǒng)計學意義。假手術組與空白對照組比較各時間點血清UCH-L1蛋白濃度,P>0.05,無統(tǒng)計學意義,表明假手術組UCH-L1蛋白濃度表達穩(wěn)定,未受手術因素的影響;HIBD組分別與假手術組和空白對照組各時間點比較血清UCH-L1蛋白濃度,P<0.05,有統(tǒng)計學意義,說明HIBD后6h血清UCH-L1蛋白表達水平明顯增高。HIBD組血清UCH-L1蛋白濃度在6h時隨時間逐漸升高,至48h到達峰值后,又隨時間逐漸下降。(6)HIBD組神

6、經(jīng)功能缺失評分與血清UCH-L1蛋白水平分析重度損傷UCH-L1蛋白濃度明顯高于輕度損傷和中度損傷,中度損傷 UCH-L1蛋白濃度高于輕度損傷,且差異均有統(tǒng)計學差異(P<0.05);血清UCHL1蛋白與神經(jīng)功能缺失評分相關。
  結論:(1)新生7日齡SD大鼠缺氧缺血性腦病模型建立成功。(2) UCH-L1蛋白可能是一種新的生物標志物,可用于新生SD大鼠缺氧缺血性腦病的早期診斷(6h)。(3)新生大鼠缺氧缺血性腦病血清UCH-L1

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