新生大鼠缺氧缺血性腦病血清S100B蛋白表達(dá)變化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：本研究建立新生SD大鼠缺氧缺血性腦損傷（hypoxic-ischemic brain damage， HIBD）模型，通過檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)血清S100B蛋白水平，探討血清S100B蛋白的表達(dá)在新生 SD大鼠缺氧缺血性腦病中的早期診斷價(jià)值，同時(shí)探索 S100B蛋白在新生SD大鼠缺氧缺血性腦病后的出現(xiàn)時(shí)間、出現(xiàn)峰值時(shí)間及消失時(shí)間，從而進(jìn)一步為臨床新生兒缺氧缺血性腦病(HIE)患兒的早期診斷及確定HIE后S100B蛋白最佳采血時(shí)間提供實(shí)驗(yàn)

2、依據(jù)。
　　方法：清潔級(jí)，封閉群，健康新生7日齡SD大鼠168只，雌雄不限，體重12～18g，隨機(jī)分為3組：假手術(shù)組，HIBD模型組，健康對(duì)照組，每組各56只，HIBD模型組采用改良Rice法制備HIBD模型。根據(jù)動(dòng)物處死時(shí)間不同HIBD組又隨機(jī)分為7個(gè)亞組：0h組、6h組、12h組、24h組、48h組、72h及96h組，每亞組各8只。假手術(shù)組及正常對(duì)照組也在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)分為7組，每組8只。各組大鼠在相應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)斷頭取血后處死，收集

3、血液及腦組織標(biāo)本。觀察各組運(yùn)動(dòng)行為學(xué)變化、腦組織形態(tài)學(xué)變化及HE染色；雙抗夾心ELISA法檢測(cè)血中S100B蛋白的變化。
　　結(jié)果：(1)7日齡SD大鼠在HIBD組建模后出現(xiàn)不同程度的行為異常，正常對(duì)照組與假手術(shù)組鼠未見異常行為(2)正常對(duì)照組、假手術(shù)組腦組織外觀正常，兩側(cè)對(duì)稱，無水腫、萎縮及壞死；HIBD模型組在建模后各時(shí)間點(diǎn)肉眼觀腦組織大體形態(tài)出現(xiàn)不同程度的異常改變(3)HE染色：正常對(duì)照組、假手術(shù)組腦組織和HIBD模型組在建

4、模后0h腦細(xì)胞層次清楚、細(xì)胞形態(tài)正常；HIBD模型組在建模后6h出現(xiàn)不同程度的神經(jīng)細(xì)胞水腫、變性；12h、24h腦組織出現(xiàn)淤血水腫和血管充血；48h、72h神經(jīng)細(xì)胞出現(xiàn)不同程度的壞死，細(xì)胞核碎裂、溶解；96h細(xì)胞出現(xiàn)大片狀壞死，細(xì)胞核碎裂、溶解。(4)血清中S100B蛋白的表達(dá)：HIBD組0h時(shí)間點(diǎn)組與正常對(duì)照組、假手術(shù)組比較血清中S100B蛋白差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；HIBD組（0h、96h時(shí)間點(diǎn)組除外）、與正常對(duì)照組、假手

5、術(shù)組比較各個(gè)時(shí)間點(diǎn)血清中S100B蛋白值顯著升高（P<0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；HIBD組48h時(shí)間點(diǎn)組分別與 HIBD組6h、12h、24h、72h時(shí)間點(diǎn)組比較血清中S100B蛋白值顯著升高（P<0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；HIBD組6h、12h、24h、72h時(shí)間點(diǎn)組組間比較血清中 S100B蛋白值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。正常對(duì)照組、假手術(shù)組、HIBD組血清中S100B蛋白含量在0h為18.89±4.68ng/L、1

6、5.21±3.27ng/L、14.39±5.68ng/L；6h分別為17.36±1.24ng/L、15.77±1.59ng/L、27.61±6.30ng/L；12h分別為16.32±2.33ng/L、15.39±0.96ng/L、21.93±5.53ng/L；24h分別為17.01±1.66ng/L、15.12±1.10ng/L、24.65±4.83ng/L；48h分別為18.33±1.99ng/L、15.45±1.78ng/L、44.

7、25±4.12ng/L；72h分別為18.47±1.85ng/L、15.21±1.94ng/L、28.39±4.53ng/L；96h分別為17.61±2.57ng/L、15.40±0.99ng/L、17.01±2.56ng/L。
　　結(jié)論：（1）新生大鼠缺氧缺血性腦病模型建立成功。（2）S100B蛋白可作為新生大鼠缺氧缺血性腦病早期診斷的生化指標(biāo)。（3）新生大鼠缺氧缺血性腦病血清中S100B蛋白在缺氧缺血發(fā)生后6小時(shí)開始升高，48