黏著斑激酶對(duì)高轉(zhuǎn)移性腺樣囊性癌細(xì)胞生物學(xué)特性影響的初步研究.pdf

1、腺樣囊性癌是口腔頜面部常見(jiàn)的惡性腫瘤，其臨床生物學(xué)特征之一就是易發(fā)生轉(zhuǎn)移，這是其預(yù)后欠佳的重要原因，而對(duì)其轉(zhuǎn)移機(jī)制知之甚少。目前已發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞內(nèi)信號(hào)分子FAK可以調(diào)節(jié)細(xì)胞的擴(kuò)散、遷移、凋亡和存活等多種功能。有關(guān)FAK在有獨(dú)特生物學(xué)行為的腺樣囊性癌中的表達(dá)是否具有與其它腫瘤相同或相似的情況是值得關(guān)注的，但迄今國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)FAK與腺樣囊性癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株Acc-M的生長(zhǎng)、體外侵襲能力和抗凋亡等生物學(xué)行為關(guān)系的研究報(bào)道。目的：通過(guò)對(duì)體外培養(yǎng)的腺樣

2、囊性癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株Ace-M采用FAK反義寡核苷酸的轉(zhuǎn)染抑制FAK的表達(dá)的方法，探討FAK與高轉(zhuǎn)移性腺樣囊性癌細(xì)胞的生物學(xué)特性的關(guān)系及其作用機(jī)制。材料與方法：利用脂質(zhì)體Lipofectamine2000介導(dǎo)的FAK寡核苷酸對(duì)Acc-M細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染，將轉(zhuǎn)染的癌細(xì)胞應(yīng)用MTT法檢測(cè)，觀察不同組Acc-M細(xì)胞的生長(zhǎng)情況；使用RT-PCR檢測(cè)Acc—M細(xì)胞株中FAK的表達(dá)，并結(jié)合免疫熒光顯微鏡觀察技術(shù)分析ASODN、SODN及對(duì)照組的不同表現(xiàn)分

3、析；Transwell小室技術(shù)，分析其侵襲能力；Tunel及FCM的方法檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況。 結(jié)果：本研究在國(guó)內(nèi)外首次觀察到：(1)Ace—M細(xì)胞中存在粘著斑激酶的表達(dá)，主要定位于細(xì)胞漿。(2)本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的反義寡核苷酸可以在在mRNA和蛋白水平上顯著抑制FAK的表達(dá)(P<0.05)。(3)FAK的抑制對(duì)Ace-M細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖有明顯的抑制作用。反義組腫瘤細(xì)胞的凋亡明顯增強(qiáng)與S。DN組、對(duì)照組則基本相似，幾乎無(wú)改變。(4)ASOD

4、N轉(zhuǎn)染組Acc-M細(xì)胞的黏附率和侵襲能力明顯降低。結(jié)論： (1)粘著斑激酶對(duì)Acc-M細(xì)胞增殖有明顯的促進(jìn)作用，并能抑制腫瘤細(xì)胞凋亡，并可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲性，可認(rèn)為FAK是腺樣囊性癌侵襲轉(zhuǎn)移及抗失巢凋亡的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中的重要信號(hào)分子(2)脂質(zhì)體Lipofectamine2000介導(dǎo)的FAK ASODN的轉(zhuǎn)染對(duì)Acc-M細(xì)胞的封閉效果明顯，可達(dá)到對(duì)FAK的特定的抑制，是一種簡(jiǎn)便實(shí)用的研究方法。 綜上所述，腺樣囊性癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株Ac