IL-18與SAP免疫和臟器損害及中藥調(diào)控作用的研究.pdf

1、本文主要從以下兩部分展開： 第一部分SAP大鼠血清IL-18與免疫損害和多臟器病理改變的關(guān)系 目的：探討SAP大鼠血清IL-18與IL-1β的相關(guān)關(guān)系；研究IL-18與脾淋巴細(xì)胞凋亡和FasL、Bcl-2mRNA表達(dá)的相關(guān)關(guān)系；分析SAP時(shí)IL-18與免疫損害和多臟器病理改變的關(guān)系。 方法：健康Wistar大鼠16只，隨機(jī)分為兩組：空白對(duì)照組(6只)和SAP模型組(10只)。采用5％牛黃膽酸鈉膽胰管內(nèi)逆行注入的方

2、法誘導(dǎo)SAP大鼠模型，觀察兩組大鼠24小時(shí)死亡率；兩組大鼠于術(shù)后24小時(shí)股動(dòng)脈取血，檢測血清IL-18、IL-1β水平；取脾組織分離淋巴細(xì)胞，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測淋巴細(xì)胞凋亡率，RT-PCR檢測淋巴細(xì)胞FasL、Bcl-2mRNA的表達(dá)；留取胰腺、肺、肝、腎行組織病理學(xué)檢查。 結(jié)果：SAP模型組大鼠多臟器病理評(píng)分、血清IL-18和血清IL-1β明顯高于對(duì)照組(P<0.01)，血清IL-18與IL-1β和多臟器病理評(píng)分成正相關(guān)關(guān)系(

3、r=0.886和r=0.807，P<0.01)；脾淋巴細(xì)胞凋亡率和FasLmRNA表達(dá)明顯高于對(duì)照組(P<0.01)，Bcl-2mRNA表達(dá)明顯低于對(duì)照組(P<0.01)；SAP時(shí)血清IL-18與脾淋巴細(xì)胞凋亡率和FasLmRNA表達(dá)成正相關(guān)關(guān)系(r=0.650和r=0.713，P<0.05)，與Bcl-2mRNA表達(dá)成負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=0.836，P<0.01)。 結(jié)論：SAP時(shí)，IL-18和IL-1β相互誘生，共同參與全身性炎

4、癥反應(yīng)，從而加重多臟器病理損害：在SAP早期即存在淋巴細(xì)胞過度凋亡，這可能是導(dǎo)致SAP早期即出現(xiàn)免疫抑制的重要原因之一，脾淋巴細(xì)胞FasLmRNA的過表達(dá)和Bcl-2mRNA的表達(dá)不足，可能是脾淋巴細(xì)胞過度凋亡的重要途徑之一；IL-18可能通過上調(diào)淋巴細(xì)胞FasLmRNA的表達(dá)和下調(diào)Bcl-2mRNA的表達(dá)，從而影響淋巴細(xì)胞過度凋亡。 第二部分中藥對(duì)SAP大鼠免疫和多臟器病理改變的調(diào)控作用 目的：探討中藥萊菔承氣湯、參芪

5、扶正注射液對(duì)SAP大鼠血清細(xì)胞因子、脾淋巴細(xì)胞凋亡率、凋亡相關(guān)基因以及多臟器病理損害的影響，分析中藥萊菔承氣湯、參芪扶正注射液對(duì)SAP大鼠免疫和多臟器病理改變的調(diào)控作用。 方法：健康Wistar大鼠36只，隨機(jī)分為四組：空白對(duì)照組(K組，6只)、SAP模型組(M組，10只)、萊菔承氣湯治療組(L組，10只)和參芪扶正注射液治療組(S組，lO只)。M組、L組和S組均采用5％牛黃膽酸鈉膽胰管內(nèi)逆行注入的方法制作SAP動(dòng)物模型。L組和

6、s組均按2.5ml中藥/100g體重，分兩次分別于造模后8h和16h灌胃；K組和M組于相同時(shí)間點(diǎn)給予等量生理鹽水灌胃。觀察各組大鼠24小時(shí)死亡率；各組大鼠于術(shù)后24小時(shí)股動(dòng)脈取血，檢測血清IL-18、IL-1β水平；取脾組織分離淋巴細(xì)胞，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測淋巴細(xì)胞凋亡率，RT-PCR檢測淋巴細(xì)胞FasL、Bcl-2mRNA的表達(dá)：留取胰腺、肺、肝、腎行組織病理學(xué)檢查。 結(jié)果：萊菔承氣湯治療組大鼠血清IL-18、IL-1β、多臟器

7、病理評(píng)分、脾淋巴細(xì)胞凋亡率和FasLmRNA表達(dá)均低于SAP模型組(P<0.05或P<0.01)，但仍高于對(duì)照組(P<0.01)；Bcl-2mRNA表達(dá)高于SAP模型組(P<0.01)，但仍低于對(duì)照組(P<0.01)。參芪扶正注射液治療組大鼠血清IL-18、IL-1β、多臟器病理評(píng)分、脾淋巴細(xì)胞凋亡率和FasLmRNA表達(dá)均低于SAP模型組(P<0.01)，但仍高于對(duì)照組(P<0.05或P<0.01)；Bcl-2mRNA表達(dá)高于SAP模

8、型組(P<0.01)，但仍低于對(duì)照組(P<0.05)。 結(jié)論：萊菔承氣湯能明顯下調(diào)SAP大鼠血清IL-18和IL-1β的表達(dá)，明顯減輕多臟器病理損害，進(jìn)一步證實(shí)了萊菔承氣湯對(duì)SAP的治療作用。萊菔承氣湯能下調(diào)脾淋巴細(xì)胞FasLmRNA的表達(dá)和上調(diào)Bcl-2mRNA的表達(dá)，可能是其減少淋巴細(xì)胞凋亡的重要途徑之一。在SAP早期應(yīng)用補(bǔ)氣養(yǎng)血中藥參芪扶正注射液，也能下調(diào)SAP大鼠血清IL-18和IL-1β的表達(dá)，減輕多臟器病理損害，初步