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1、研究背景和目的:骨髓間質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)易于獲取,并且易于培養(yǎng)擴(kuò)增,異體移植到相關(guān)宿主中不會(huì)發(fā)生明顯排斥反應(yīng),并且在體外能夠迅速增殖,而且BMSCs是良好的基因工程載體細(xì)胞,經(jīng)過基因改建后仍通常保持原有的增殖的能力,因此,BMSCs在移植治療許多疾病時(shí)是一種更具有應(yīng)用前景的方法,但移植后如何從受體辨別供體細(xì)胞,并觀察其在活體內(nèi)的生存遷徙情況一直是困擾其臨床應(yīng)用的瓶頸。本文旨在研究磁共振對(duì)比增強(qiáng)劑Gd-DTPA標(biāo)記骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的可
2、行性及標(biāo)記之后體內(nèi)外MRI成像示蹤的可能性。
方法:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞由SD大鼠雙側(cè)股骨骨髓中獲取,培養(yǎng)、傳代并純化細(xì)胞,采用臨床通用Gd-DTPA增強(qiáng)劑標(biāo)記骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;透射電子顯微鏡觀察標(biāo)記情況,并用臺(tái)盼藍(lán)染色方法及MTT法測(cè)定標(biāo)記細(xì)胞的活力及增殖能力;改良線栓法制備大鼠腦缺血模型;對(duì)標(biāo)記的細(xì)胞進(jìn)行體外以及腦缺血模型7T MRI成像。
結(jié)果:透射電子顯微鏡可清晰觀察到Gd-DTPA顆粒大部分存在于骨髓間充質(zhì)干細(xì)
3、胞細(xì)胞漿中,少許貼于細(xì)胞膜上。臺(tái)盼藍(lán)染色方法證實(shí)標(biāo)記之后細(xì)胞的存活率沒有受到影響, MTT法證實(shí)標(biāo)記之后對(duì)BMSCs增殖能力沒有影響(P>0.05)。體外試管掃描示標(biāo)記細(xì)胞呈高T1WI信號(hào)強(qiáng)度(P<0.05),并且持續(xù)時(shí)間較久。在腦缺血模型中標(biāo)記的細(xì)胞逐漸沉積于病變區(qū)。
結(jié)論:Gd—DTPA標(biāo)記細(xì)胞之后,BMSCs的活性及增殖能力沒有受到影響,并且透射電鏡結(jié)果證實(shí)Gd-DTPA顆粒存在于細(xì)胞胞漿內(nèi),在細(xì)胞胞膜上也有Gd-DTP
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