類風濕關(guān)節(jié)炎亞甲基四氫葉酸還原酶基因多態(tài)性及其與甲氨蝶呤治療的研究.pdf

1、背景:類風濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid　arthritis，RA)是一種累及周圍關(guān)節(jié)為主的多系統(tǒng)性炎癥性的自身免疫病，我國的患病率為0.32％-0.36％，是造成我國人群喪失勞動力和致殘的主要病因之一。甲氨蝶呤(methotrexate，MTX)作用機制與對葉酸依賴的酶抑制有關(guān)，已證實其可降低RA活動度，延緩、穩(wěn)定骨質(zhì)侵蝕的進展，且價格低廉，可與多種改善病情藥(disease-modifying antirheumatic drug，

2、DMARDs)或生物制劑聯(lián)合應(yīng)用，在RA治療中處于中心和不可替代的地位。但研究表明僅有約45％-65％的病人有良好的臨床反應(yīng)，10％-30％的病人因不良反應(yīng)而中斷了治療。藥物遺傳學(pharmacogeneties)的發(fā)展揭示：個體基因遺傳差異是藥物療效和不良反應(yīng)的重要原因。目前國內(nèi)外研究的最多的有關(guān)RA患者對MTX療效及不良反應(yīng)的基因為亞甲基四氫葉酸還原酶基因(methylenetetrahydrofolatereductase，MT

3、HFR)，但研究結(jié)果報道不一致，原因可能與樣本量小及種族差異等有關(guān)。為了解中國RA患者MTHFR基因多態(tài)性與MTX療效和安全性的關(guān)系，擬采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction，F(xiàn)Q-PCR)方法檢測本地區(qū)RA患者MTHFR基因677C/T，1298A/C多態(tài)性，研究其與MTX療效及不良反應(yīng)的相關(guān)性，為個體化用藥提供初步的理論依

4、據(jù)。 目的:研究MTHFR基因677C/T(rS1801133)、1298A/C(rs1801131)單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism，SNP)在正常人群和RA患者及RA有心血管病變患者中的分布狀況、RA患者MTX治療反應(yīng)，探討此兩種SNP與RA患者使用MTX治療的療效和不良反應(yīng)及心血管病變的相關(guān)性。 方法:收集RA患者184例，其中男43例，女141例，年齡18-76歲，

5、均符合美國風濕病學會(American College Rheumatology，ACR)1987年診斷標準。分為單用MTX組60例、MTX聯(lián)用其他DMARD組92例、使用非MTX的DMARD組32例，于治療前及治療后24周檢查臨床及實驗室指標，評價療效及不良反應(yīng)。同時選擇年齡性別相匹配的100例健康志愿者作為正常對照組。RA患者出現(xiàn)高血壓、心電圖提示ST-T改變或心臟彩超改變同時患者伴有心悸、胸悶、胸痛等癥狀時考慮其有心血管病變。采用

6、FQ-PCR方法檢測RA患者及100例正常對照組的MTHFR基因C677T及A1298C多態(tài)性，比較兩組間基因型分布及等位基因頻率，分析其與MTX療效及不良反應(yīng)的相關(guān)性。 結(jié)果1.RA與正常對照組MTHFR基因677C/T及1298A/C基因型分布及等位基因頻率差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)?！　?.677CC/CT/TT基因型分布在RA有心血管并發(fā)癥組與正常對照組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；未能見到1298A/C的

7、基因型分布(AA/AC/CC)在RA心血管并發(fā)癥組與正常對照組之間的差異。 3.在單用MTX治療者中，有效組1298AC及CC基因型明顯高于治療無效組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，677TT?；蛐徒M藥物不良反應(yīng)發(fā)生率明顯高于CC基因型組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 4.在MTX聯(lián)用其他DMARD藥組，療效與1298A/C、677C/T多態(tài)性無明顯相關(guān)，不良反應(yīng)發(fā)生率677TT和CT基因型組明顯高于CC基因