載脂蛋白E對小鼠卵泡發(fā)育影響機制的研究.pdf

1、肥胖伴隨著生活水平的提高逐漸流行起來,與此同時肥胖導致的疾病也迅速增長。肥胖可導致多種病癥,全身各器官都可能受影響,對女性有更大的危害。在生殖系統(tǒng)方面,肥胖可導致女性排卵障礙使不孕率升高,多囊卵巢綜合征(PCOS),早期子癇,妊娠高血壓,月經失調,婦科癌癥。
　　載脂蛋白E(Apolipoprotein E,ApoE)是載脂蛋白家族的一個成員。APOE主要在肝臟和腦中合成,巨噬細胞也可合成一部分。APOE作用包括參與神經系統(tǒng)的修復

2、、免疫調節(jié)、脂質的代謝。參與脂質代謝是APOE的主要功能,它作為極低密度脂蛋白(VLDL)和乳糜微粒(CM)的組成成分,能夠清除血液中VLDL和CM的殘粒,調節(jié)血清脂質濃度;作為低密度脂蛋白(LDL)受體的配體介導LDL的組織吸收;作為高密度脂蛋白(HDL)的成分參與膽固醇的逆轉。鑒于 APOE在脂質代謝過程中的重要作用,ApoE基因敲除模型被廣泛應用,該模型在正常飲食下即出現脂質代謝紊亂和高脂血癥,因此它是研究高脂血癥發(fā)病機理以及干預

3、措施的理想模型。國內外研究大都集中在動脈粥樣硬化及其藥物的篩選上。
　　類固醇激素是一類以膽固醇為底物合成的性激素,具有極為重要的生理作用,主要包括雌激素、雄激素、孕酮,它們對生殖的調控發(fā)揮極大作用。由于類固醇激素與膽固醇和生殖的密切聯(lián)系,本實驗室首次利用了ApoE-/-模型研究ApoE對小鼠生殖能力的影響。結果表明ApoE-/-小鼠出現嚴重高血脂癥,脂質代謝紊亂,脂質在卵巢中積累,造成卵巢超重,在ApoE-/-小鼠性成熟后的發(fā)情

4、周期出現紊亂,發(fā)情期的天數顯著低于野生型。ApoE-/-小鼠在出生時卵泡較多,但是凋亡很快,在出生后100天(D100)卵泡數目相對于野生型顯著下降,表明ApoE的缺失對小鼠卵泡發(fā)育產生一定的影響。本實驗以先前的研究為基礎,繼續(xù)探究了ApoE缺失對卵泡發(fā)育影響的機制。本實驗選取了出生后4天(D4)和100天(D100)的小鼠的卵巢,首先對磷脂酰肌醇-3(PI3K)信號通路相關基因絲氨酸蘇氨酸蛋白激酶1(Akt1)、BCL-2相關的細胞死

5、亡激活劑(Bad)、哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、核轉錄因子κb(Nfkb)、磷酸酶與張力同源蛋白(Pten)、結節(jié)硬化蛋白復合物2(Tsc2)以及類固醇激素合成相關基因細胞色素p450芳香化酶(Cyp19a1)、3β-羥化類固醇脫氫酶(Hsd3b)的表達量進行了研究。Real-time PCR結果證明在D100中的ApoE-/-小鼠中的Cyp19a1、Hsd3b、mTOR、Nfkb,相對于野生型小鼠顯著下降,Bad、Tsc2顯著

6、上升。而在D4,ApoE-/-小鼠中的Hsd3b和mTOR的表達是顯著上調的。之后我們又選取了野生型和ApoE-/-小鼠出生后56天(D56)和出生后100天(D100)的小鼠對血清中的雌激素和孕酮水平進行檢測。所有小鼠均處于發(fā)情前期。結果表明在D100時ApoE-/-小鼠血清中的雌激素和孕酮水平顯著低于野生型,而在D56時沒有明顯變化。由此我們得出結論ApoE的缺失可能干擾了PI3K信號通路以及類固醇激素合成相關基因的表達進而影響卵泡