西瓜材料親緣關(guān)系及分類的RAPD分析.pdf

1、本文對西瓜材料親緣關(guān)系及分類進(jìn)行了RAPD分析。文章采用正交試驗設(shè)計的方法，建立了西瓜RAPD分析的優(yōu)化反應(yīng)體系。所得最優(yōu)體系為：25μL的反應(yīng)體系中含有TaqBuffer25mmol/L，MgCL21.5mmol/L，dNTP250μmol/L，TaqEnzyme2.5U，Primer0.4μmol/L，DNA(10ng/μL)1μL；適宜的擴增條件為94℃預(yù)變性5min，94℃變性30s，36℃復(fù)性30s，72℃延伸lmin，40個

2、循環(huán)后，在72℃保持7分鐘；從59個隨機引物中篩選出9個多態(tài)性好的隨機引物，用這9個引物對42個西瓜材料進(jìn)行擴增，9個引物共擴增出了92條DNA擴增帶，平均每個引物10.2條，其中76條具有多態(tài)性，占總條帶數(shù)的82.6％，每個引物可擴增出5-16條多態(tài)性帶，平均每個引物8.4條多態(tài)性帶；利用計算機軟件NTSYSpc(2.10版)統(tǒng)計RAPD數(shù)據(jù)，用GeneticDistance計算材料間遺傳距離。得出42個西瓜材料的遺傳距離為0.065