李及其近緣種親緣關(guān)系的RAPD分析.pdf

1、李及其近緣種栽培歷史悠久,分布廣泛,是一類重要的經(jīng)濟(jì)果樹.由于品種間的引入導(dǎo)致許多同名異物或同物異名的現(xiàn)象比較普遍,影響李種質(zhì)資源的評價(jià)和利用.以往多從形態(tài)學(xué)、孢粉學(xué)、同工酶等方面研究李及其近源種種質(zhì)的分類演化,取得了一定的成果.但還存在許多分歧,在技術(shù)手段上也存在著一定的局限性.該研究通過RAPD技術(shù),從DNA水平上研究李及其近緣種的分類、遺傳演化關(guān)系.主要結(jié)果如下:1.用高鹽低pH法、改良SDS法和CTAB法三種方法提取李的幼嫩葉片

2、基因組DNA,結(jié)果表明高鹽低pH法是較好的提取李基因組DNA的方法.增加鹽的濃度能夠避免提取的基因組DNA呈凝膠狀,有利于多糖的去除;在基因組DNA提取過程中,干粉PVP和巰基乙醇一同使用去除酚類物質(zhì)的效果較好.2.從200個(gè)隨機(jī)引物中篩選出具有多態(tài)性強(qiáng)、帶型清晰的引物18個(gè),在分析李及其近緣種種質(zhì)時(shí)均得到成功應(yīng)用.3.用18個(gè)隨機(jī)引物擴(kuò)增的指紋圖譜分析所得到的聚類樹狀圖表明郁李與李的遺傳距離為0.0491,表現(xiàn)出很近的親緣關(guān)系;而與櫻

3、桃的遺傳距離為0.3761,表現(xiàn)出較遠(yuǎn)的親緣關(guān)系,因此,應(yīng)將郁李視為李的一個(gè)種.4.在遺傳距離0.1978~0.2999的水平上,供試的41份材料聚分為4類:桃類、杏梅類、櫻桃類和李類.從指紋圖譜來看,各類有其特有的特征譜帶.因此,本研究結(jié)果支持將核果類果樹分成不同的屬,即桃屬、杏梅屬、櫻屬和李屬.5.在遺傳距離為0.1201~0.1326時(shí),所有材料分為11類,桃為第1類;杏聚分為第2、3類;花梅為第4類;美人梅為第5類;櫻桃為第6類