甲亢肝陽上亢證大鼠下丘腦和腎上腺組織的蛋白質(zhì)組學(xué)分析.pdf

1、本文的目的是建立甲亢肝陽上亢證大鼠與正常大鼠的下丘腦和腎上腺雙向凝膠電泳圖譜，尋找差異表達(dá)的蛋白質(zhì)點(diǎn)，探討其功能和作用，以期揭示甲亢肝陽上亢證的本質(zhì)。文中將20只SD大鼠隨機(jī)分為正常組和模型組各10只，正常組不做任何處理，每天進(jìn)行正常飲食。模型組用加灌附子湯和左甲狀腺素鈉(I-T4)的方法，造成甲亢肝陽上亢證大鼠模型。所有大鼠于第22天處死。以一般情況和T<,3>、T<,4>作為判斷動(dòng)物模型是否復(fù)制成功的指標(biāo)。同時(shí)，將正常組與模型組大鼠

2、下丘腦和腎上腺組織進(jìn)行雙向凝膠電泳，圖像處理找出差異蛋白，并利用質(zhì)譜和生物信息學(xué)技術(shù)對(duì)其進(jìn)行鑒定和分析。 1.兩組大鼠的一般情況和T<,3>、T<,4>值有顯著差異，由此判斷動(dòng)物模型復(fù)制成功。 2.通過PDQuest7.0分析軟件進(jìn)行點(diǎn)檢測(cè)，獲得兩組組大鼠的蛋白質(zhì)點(diǎn)數(shù)，下丘腦組織正常組(764±30)個(gè)，模型組(755±28)個(gè)。腎上腺組織正常組(690±33)個(gè)，模型組(715±25)個(gè)。模型組與正常組比較分析，下丘腦

3、組織模型組中蛋白質(zhì)點(diǎn)表達(dá)上調(diào)的點(diǎn)有18個(gè)，下調(diào)的點(diǎn)有24個(gè)；腎上腺組織模型組中蛋白質(zhì)點(diǎn)表達(dá)上調(diào)的點(diǎn)有32個(gè)，下調(diào)的點(diǎn)有6個(gè)。然后通過質(zhì)譜技術(shù)和蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)比較，對(duì)其中的部分差異蛋白點(diǎn)進(jìn)行鑒定。結(jié)果顯示，下丘腦模型組較正常組上調(diào)的有硫氧還蛋白、NSFL1 輔助因子；下調(diào)的有泛素羧基末端水解酶同工酶L1、血小板活化因子乙?；饷窱B-r亞單位、谷氨酸脫氫酶前體、二氫嘧啶酶相關(guān)蛋白2和微管蛋白B-5。腎上腺組織模型組中上調(diào)的部分蛋白質(zhì)為Gr

4、pE蛋白同系物1、熱休克蛋白60kDa、鈣網(wǎng)織蛋白前體、脂酰輔酶A脫氫酶、異戊酰輔酶A脫氫酶和乙醛脫氫酶。 研究結(jié)論：1.通過雙向凝膠電泳技術(shù)初步建立了甲亢肝陽上亢證大鼠及正常大鼠下丘腦和腎上腺組織蛋白質(zhì)組表達(dá)圖譜。2.通過凝膠圖像分析，模型組與正常組大鼠下丘腦和腎上腺組織2-DE圖譜的表達(dá)具有差異性。3.通過質(zhì)譜技術(shù)和蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)比較鑒定出13種差異表達(dá)蛋白質(zhì)。初步認(rèn)為這些差異蛋白質(zhì)可能通過氧化還原反應(yīng)、蛋白質(zhì)降解通路、細(xì)胞分