IFN-β1a對多發(fā)性硬化樹突狀細胞共刺激分子表達和成熟狀態(tài)影響的研究.pdf

1、目的：研究多發(fā)性硬化(MS)患者外周血單核細胞誘導樹突狀細胞(DC)的體外培養(yǎng)擴增和鑒定；從分子水平分析DC在MS病理免疫中的作用；探討IFN-β1a對患者DC共刺激分子、成熟狀態(tài)的影響。 方法：設立MS組(10例)和健康對照組(8人)，抽取外周血20ml，采用梯度密度離心法提取單核細胞。在體外經(jīng)rhGM-CSF100ng/mL和thlL-450ng/mL聯(lián)合培養(yǎng)誘導成為DC，用LPS刺激成熟，經(jīng)IFN-β1a(rebif)處理

2、，于培養(yǎng)的第九天用倒置相差顯微鏡和電鏡進行形態(tài)學鑒定；流式細胞儀檢測HLA-DR、CD80、CD86、CD83表達水平。 結(jié)果：第5天體外培養(yǎng)的DC由貼壁狀態(tài)變?yōu)閼腋∶虪罴毎?，?天為形態(tài)不規(guī)則的毛刺狀，呈現(xiàn)典型DC形態(tài)；流式細胞儀檢測健康人成熟DC的各項表型CD80、CD86、CD83、HLA-DR表達百分率分別為(73.2±11)％、(90.4±5.2)％、(81.4±10.3)％和(91.3±5.9)％。MS組DC表達C

3、D83、CD86明顯低于健康對照組(p<0.05)。兩組間CD80、HLA-DR的表達無顯著差異性(p>0.05)。經(jīng)IFN-βla處理后MS組DC表達CD83、CD86均顯著上調(diào)(p<0.05)，而DC表型HLA-DR和CD80表達顯著下調(diào)(p<0.05)。 結(jié)論： 1、利用rhGM-CSF聯(lián)合rhIL-4誘導人外周血細胞單核細胞，能得到大量純度較高的DC，是一種比較簡便經(jīng)濟的DC培養(yǎng)方法，有一定的臨床應用價值；