納米細(xì)菌感染與Ⅲ型前列腺炎的關(guān)系研究.pdf

1、背景及目的：慢性前列腺炎是泌尿科的臨床常見病，約占門診患者數(shù)的8％。根據(jù)NIH的最新分類，Ⅲ型前列腺炎(ⅢA-inflammatoryCPPSandⅢB-noninflammatoryCPPS，NIHClassificationSystemforProstatitis，1998)在臨床最為常見，占前列腺炎的60％以上。該病的病因至今仍不清楚，其診治已成為國際泌尿界的難題。在臨床實踐中，我們注意到Ⅲ型前列腺炎的某些臨床特征無法用現(xiàn)有的病因

2、學(xué)理論解釋。例如，(1)雖然常規(guī)檢查及培養(yǎng)無菌，但前列腺確實存在炎癥或炎癥標(biāo)記物陽性；(2)前列腺中經(jīng)常發(fā)現(xiàn)結(jié)石或鈣化；(3)抗生素治療能夠取得一定效果。這些特點提示我們可能有不被認(rèn)知的感染性病因存在。 Nanobacteria的發(fā)現(xiàn)及其致病特點為闡明Ⅲ型前列腺炎的病因提供了全新的切入點。納米細(xì)菌是芬蘭科學(xué)家Kajander在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時發(fā)現(xiàn)，直徑約50～500nm，革蘭陰性，呈球狀或球桿狀，細(xì)胞壁厚，無莢膜與鞭毛。納米細(xì)菌在

3、普通的微生物培養(yǎng)條件下不能生長繁殖，需要在細(xì)胞培養(yǎng)條件下才能生長。 納米細(xì)菌能感染人體多種組織器官，釋放毒素引起組織炎癥。納米細(xì)菌具有獨特的生物礦化現(xiàn)象，能產(chǎn)生堅硬的礦化外殼覆蓋于菌體周圍，導(dǎo)致被感染組織發(fā)生病理性鈣化?，F(xiàn)已研究發(fā)現(xiàn)，納米細(xì)菌感染與腎結(jié)石、多囊腎、動脈粥樣硬化等疾病密切相關(guān)。體內(nèi)感染的納米細(xì)菌主要經(jīng)泌尿系統(tǒng)排出，故其可隨尿液返流進(jìn)入前列腺腺管，引起前列腺的炎癥。 本課題針對納米細(xì)菌感染與Ⅲ型前列腺炎的關(guān)系

4、進(jìn)行系統(tǒng)研究，以期為闡明Ⅲ型前列腺炎的病因找到新的線索和依據(jù)，并為該病的臨床診療提供新的思路。 方法： 第一部分：對CPPS患者(n=48)和健康男性(n=48)的VB1，VB2，EPS，VB3分別進(jìn)行納米細(xì)菌分離培養(yǎng)，采用單克隆抗體間接免疫熒光染色(IIFS)、激光共聚焦顯微鏡(CLSM)和透射電鏡(TEM)鑒定納米細(xì)菌，以驗證Ⅲ型前列腺炎患者前列腺中是否存在納米細(xì)菌感染，并比較CPPS患者陽性率與健康男性陽性率的差異

5、。 第二部分：將上述CPPS患者隨機(jī)分為兩組：anti-NB組(n=24)和對照組(n=24)，分別給予抗納米細(xì)菌治療與安慰劑治療，比較治療前后EPS納米細(xì)菌培養(yǎng)陽性率及患者癥狀程度(NIH-CPSI)的差異，評價抗納米細(xì)菌治療對Ⅲ型前列腺炎的療效。 第三部分：采用ELISA檢測CPPS患者(n=20)和健康男性(n=20)EPS中炎性因子TNF-α和IL-6水平，比較兩組間的差異。從外周血中分離培養(yǎng)單核細(xì)胞(PBMC)

6、，用培養(yǎng)的納米細(xì)菌刺激PBMC，用ELISA檢測TNF-α和IL-6水平的變化，從而在細(xì)胞水平探討納米細(xì)菌致Ⅲ型前列腺炎的分子機(jī)制。 結(jié)果：主要研究結(jié)果如下： 1.CPPS組和對照組的VB1、VB2經(jīng)培養(yǎng)均未發(fā)現(xiàn)納米細(xì)菌。 2.CPPS組的EPS和VB3中納米細(xì)菌陽性率分別為58.3％和10.4％，而對照組EPS和VB3中陽性率分別為4.2％和2.1％，兩組間差異顯著(P＜0.01)。 3.IIFS-CL

7、SM觀察發(fā)現(xiàn)納米細(xì)菌大小不等，聚集成簇，并且呈聚集的趨勢。TEM觀察發(fā)現(xiàn)納米細(xì)菌呈球狀或球棒狀，直徑100～500nm，聚集成簇，菌體覆蓋黑色被膜，周圍有結(jié)晶體形成。 4.Anti-NB組納米細(xì)菌培養(yǎng)陽性率治療后較治療前顯著降低(P＜0.01)，而對照組治療前后無明顯差異(P＞0.05)。 5.Anti-NB組患者癥狀(NIH-CPSI)治療后較治療前顯著減輕(P＜0.01)，而對照組治療前后無明顯差異(P＞0.05)。

8、 6.CPPS組EPS的IL-6、TNF-α水平均明顯高于對照組(P＜0.01)。 7.NB刺激PBMC后，TNF-α、IL-6水平顯著高于對照(P＜0.01)。 結(jié)論： 1.Ⅲ型前列腺炎患者前列腺中存在納米細(xì)菌感染，并且感染率顯著高于健康男性。 2.四環(huán)素作為抗納米細(xì)菌的首選藥，對改善CPPS患者的癥狀，并抑制前列腺中的納米細(xì)菌有顯著的療效。 3.Ⅲ型前列腺炎患者前列腺中炎性因子水平顯著