Wnt信號(hào)傳導(dǎo)通路異常激活及E-cadherin-catenins復(fù)合體異常表達(dá)與胃癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究.pdf

1、目的：胃癌 (Gastric Carcinoma) 是我國(guó)最為常見的消化道惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和死亡率位居我國(guó)惡性腫瘤的首位。為提高胃癌患者的治療效果，應(yīng)對(duì)其發(fā)生和發(fā)展機(jī)制進(jìn)行更深一步的研究。Wnt信號(hào)傳導(dǎo)通路是一種對(duì)細(xì)胞增殖和分化具有重要調(diào)節(jié)作用的信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)，越來越多的研究證明，Wnt通路除了參與調(diào)控發(fā)育過程以外，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展也有著密切的關(guān)系。該傳導(dǎo)通路的關(guān)鍵因子β-catenin同時(shí)還作為E-cadherin/catenin

2、s復(fù)合體的成員調(diào)節(jié)細(xì)胞間的黏附。本課題通過研究Wnt信號(hào)傳導(dǎo)通路及E-cadherin/catenins復(fù)合體所涉及的Wnt2、β-catenin、α-catenin、E-cadherin在胃癌組織、癌旁組織及正常胃粘膜中的表達(dá)情況，探討Wnt信號(hào)傳導(dǎo)通路與E-cadherin/catenins復(fù)合體的關(guān)聯(lián)性，并進(jìn)一步探討這幾種蛋白在胃癌發(fā)生、發(fā)展及浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移過程中的作用以及它們之間的相關(guān)性，為臨床診療與判斷預(yù)后提供有價(jià)值的分子指標(biāo)。

3、 方法： 1 應(yīng)用免疫組織化學(xué) (immunohistochemistry，IHC)S-P法檢測(cè)了62例胃癌組織、35例癌旁組織和22例正常粘膜中Wnt2、β-catenin、α-catenin、E-cadherin的表達(dá)情況。 2 應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)(Flow Cytometrye，F(xiàn)CM)的方法定量檢測(cè)30例胃癌組織、15例癌旁組織和15例正常胃粘膜組織中 Wnt2、β-catenin的含量。 3 運(yùn)用統(tǒng)計(jì)軟件SP

4、SS11.5對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果：1 正常胃粘膜、癌旁組織、胃癌組織中β-catenin的胞膜表達(dá)強(qiáng)度呈下降趨勢(shì)，而胞漿的表達(dá)強(qiáng)度呈上升趨勢(shì)，三組之間差異有顯著性(P<,膜><0.01；P<,漿><0.01)；分別將β-catenin的胞膜表達(dá)和胞漿表達(dá)進(jìn)行組間兩兩比較，差異均有顯著性(P<0.05)。β-catenin胞膜的異常表達(dá)與腫瘤的浸潤(rùn)深度(P<0.05)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P<0.01)有關(guān)，而與病理分級(jí)、臨床分期以

5、及患者的年齡、性別無關(guān) (P>0.05)；β-catenin胞膜的異常表達(dá)與腫瘤的浸潤(rùn)深度 (P<0.05)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 (P<0.01)有關(guān)，而與病理分級(jí)以及患者的年齡、性別無關(guān) (P>0.05)。 應(yīng)用FCM法檢測(cè)β-catenin在細(xì)胞內(nèi)的總含量，正常粘膜組、癌旁組和胃癌組的β-catenin表達(dá)量的FI值(x±s)分別為1.00±0.06、0.97±0.05和0.88±0.07，三組相比有顯著性差異(P<0.01)。胃癌

6、組織中β-catenin的總含量低于正常組與癌旁組(P<0.01)，而正常組與癌旁組相比無顯著性差異(P>0.05)。 2 Wnt2在胃癌組織中高表達(dá)，而在正常粘膜與癌旁組織中表達(dá)很低，三組相比有顯著性差異(P<0.01)；將三組間進(jìn)行兩兩比較，胃癌組Wnt2的表達(dá)明顯高于正常組(P<0.01)與癌旁組(P<0.05)，正常組與癌旁組相比差異也有顯著性(P<0.01)。Wnt2的表達(dá)與腫瘤的浸潤(rùn)深度(P<0.01)有關(guān)，而與淋巴

7、結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、病理分級(jí)以及患者的年齡、性別均無關(guān) (P>0.05)。 應(yīng)用FCM法對(duì)Wnt2進(jìn)行檢測(cè)，Wnt2在正常粘膜組、癌旁組和胃癌組的FI值(x±s)分別為1.00±0.11、1.08±0.65和4.95±1.54，三組相比有顯著性差異(P<0.01)；癌組織中Wnt2的表達(dá)明顯高于正常組和癌旁組(P<0.01)，而正常組與癌旁組相比無顯著性差異(P>0.05)。 3 E-cadherin在正常組、癌旁組、胃癌

8、組中的表達(dá)量呈下降趨勢(shì)，并且三組相比有顯著性差異(P<0.01)；進(jìn)行三組間的兩兩比較，可見正常組分別與胃癌組及癌旁組相比，差異有顯著性(P<0.01)，而癌旁組與胃癌組相比，無顯著性差異(P>0.05)。E-cadherin的異常表達(dá)與腫瘤的浸潤(rùn)深度(P<0.05)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P<0.01)、病理分級(jí)(P<0.05)、臨床分期(P<0.01)有關(guān)，而與患者的年齡、性別無關(guān)(P>0.05)。 4 在正常粘膜組、癌旁組、胃癌組中

9、，α-catenin的表達(dá)量呈下降趨勢(shì)，并且三組相比有顯著性差異(P<0.01)。進(jìn)行組間兩兩比較，正常組與胃癌組、癌旁組與胃癌組、正常組與癌旁組相比，差異均有顯著性(P<0.01)。α-catenin的異常表達(dá)除與病理分級(jí)有關(guān)外(P<0.01)，與腫瘤的浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期以及患者的年齡、性別均無關(guān)(P>0.05)。 5 應(yīng)用Spearman等級(jí)相關(guān)分析，Wnt2的表達(dá)與β-catenin的胞漿表達(dá)呈明顯正相關(guān)(P<

10、0.01)，而與β-catenin的膜表達(dá)，E-cadherin的膜表達(dá)及α-catenin的膜表達(dá)均無相關(guān)性，但卻能呈現(xiàn)出負(fù)向趨勢(shì) (α-catenin除外)；E-cadherin的表達(dá)與β-catenin的胞漿表達(dá)呈明顯負(fù)相關(guān)(P<0.01)，而與β-catenin的胞膜表達(dá)呈正相關(guān)(P<0.05)；E-cadherin膜表達(dá)的減少或消失與α-catenin的膜表達(dá)減少呈明顯正相關(guān) (P<0.01)；α-catenin與β-cate

11、nin的膜表達(dá)呈正相關(guān)(P<0.05)，而與β-catenin的胞漿表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。 結(jié)論：1．Wnt通路中的信號(hào)蛋白Wnt2在胃癌組織的表達(dá)較正常胃粘膜及癌旁組織明顯上調(diào)，β-catenin的胞膜表達(dá)減弱或消失、胞漿內(nèi)積聚也明顯增加，表明Wnt通路在胃癌中處于激活狀態(tài)，提示該傳導(dǎo)通路的異常激活與胃癌的發(fā)生關(guān)系密切。 2．在胃癌組織中，Wnt2表達(dá)的上調(diào)與β-catenin的胞漿內(nèi)積聚呈明顯正相關(guān)，提示信號(hào)

12、蛋白Wnt2的表達(dá)上調(diào)可能是導(dǎo)致β-catenin在胞漿內(nèi)積聚的原因之一，并且β-catenin的胞漿積聚與腫瘤的浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期有關(guān)，提示β-catenin的這種異常分布與胃癌的惡性表型有關(guān)，并在侵襲和轉(zhuǎn)移中起重要作用。 3．E-cadherin在胃癌組織中的表達(dá)量明顯低于正常粘膜及癌旁組織，提示 E-cadherin的異常表達(dá)與胃癌的發(fā)生有關(guān)。同時(shí)，E-cadherin 的異常表達(dá)與腫瘤浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、病

13、理分級(jí)、臨床分期均有關(guān)，提示其異常表達(dá)可能在癌細(xì)胞的播散方面起重要作用，從而使其對(duì)胃癌患者的轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)具有潛在的價(jià)值。 4．α-catenin在胃癌組織中的表達(dá)量明顯低于正常粘膜及癌旁組織，提示α-catenin的異常表達(dá)與胃癌的發(fā)生有關(guān)。但α-catenin的異常表達(dá)與腫瘤的浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期均無關(guān)。 5．E-cadherin除作為E-cadherin/catenins復(fù)合體的成員之一參與細(xì)胞粘附作用外，