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文檔簡介
1、毛囊干細(xì)胞周期性的活化與靜息,是毛囊正常周期性生長的基礎(chǔ)。毛囊干細(xì)胞在一些物理、化學(xué)因素作用下,可發(fā)生持續(xù)的激活,出現(xiàn)活化異常,這將引發(fā)毛囊干細(xì)胞耗竭或皮膚新生物的形成。Wnt/β-catenin信號通路在毛囊干細(xì)胞正?;罨^程中起著關(guān)鍵的作用,但目前對于該信號通路在毛囊干細(xì)胞異?;罨械淖饔眉芭c誘發(fā)毛囊干細(xì)胞異?;罨囊蛩亻g的關(guān)系所知甚少。腫瘤促進(jìn)劑TPA能誘導(dǎo)毛囊干細(xì)胞的異?;罨?,聯(lián)合DMBA處理后,可進(jìn)一步促進(jìn)皮膚新生物的形成。本
2、文檢測了TPA單獨(dú)及聯(lián)合DMBA處理的皮膚中Wnt/β-catenin信號通路關(guān)鍵分子的表達(dá),分析了阻斷Wnt/B-catenin信號通路后,TPA誘導(dǎo)的毛囊干細(xì)胞異常活化的變化情況,以求證實(shí)Wnt/β-catenin信號通路參與了TPA誘導(dǎo)毛囊干細(xì)胞異?;罨倪^程,TPA能通過激活Wnt/β-catenin信號通路,誘導(dǎo)毛囊干細(xì)胞的異?;罨?br> 目的
通過分析TPA單獨(dú)及聯(lián)合DMBA處理的皮膚中Wnt/β-c
3、atenin信號通路關(guān)鍵分子的表達(dá),及阻斷Wnt/β-catenin信號通路后,TPA誘導(dǎo)的毛囊干細(xì)胞異?;罨淖兓闆r,探討Wnt/β-catenin信號通路在毛囊干細(xì)胞異?;罨械淖饔眉芭c誘發(fā)毛囊干細(xì)胞異常活化的因素間的關(guān)系。
方法
1、本研究利用TPA處理7周大小的雌性小鼠背部皮膚1、2、4周后,HE染色檢測毛囊形態(tài)的變化、免疫熒光技術(shù)檢測毛囊干細(xì)胞標(biāo)記物表達(dá)及增殖情況、RT-PCR、Western b
4、lot以及免疫熒光技術(shù)檢測Wnt/β-catenin信號通路關(guān)鍵分子的表達(dá)。在TPA處理4周的小鼠背部皮膚上分別注射DKK1質(zhì)粒和N1質(zhì)粒,HE染色和免疫熒光技術(shù)檢測Wnt/β-catenin通路被抑制后TPA誘導(dǎo)的毛囊的形態(tài)學(xué)變化、毛囊干細(xì)胞標(biāo)記物表達(dá)及增殖情況。
2、本研究還進(jìn)一步利用HE染色以及免疫熒光技術(shù)檢測了DMBA/TPA長期處理小鼠背部皮膚后皮脂腺樣新生物的形態(tài)學(xué)變化、皮脂腺樣新生物的分化特征、毛囊干細(xì)胞的活
5、性以及Wnt/β-catenin信號通路的變化。
結(jié)果
1、進(jìn)一步驗(yàn)證了TPA處理后毛囊干細(xì)胞被活化,促使靜止期的毛囊提前提前進(jìn)入生長期:2、首次發(fā)現(xiàn)了TPA處理毛囊角質(zhì)形成細(xì)胞后Wnt/β-catenin信號通路的關(guān)鍵分子表達(dá)上調(diào);3、在TPA處理的小鼠背部皮膚內(nèi)靶向抑制Wnt/β-catenin信號通路后,毛囊干細(xì)胞的異?;罨艿揭种?,毛囊延遲進(jìn)入生長期;4、在DMBA/TPA誘導(dǎo)的皮脂腺樣新生物內(nèi)發(fā)現(xiàn)毛
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