固相法合成丙型肝炎疫苗多肽工藝研究.pdf

1、本文以工業(yè)化生產(chǎn)為目的，研究了用Fmoc固相法人工合成丙型肝炎疫苗多肽(以下簡(jiǎn)稱疫苗多肽)的生產(chǎn)工藝，比較了Wang樹脂和二氯三苯甲基樹脂(以下簡(jiǎn)稱二氯樹脂)在固相合成中的的優(yōu)勢(shì)和劣勢(shì)，以及粗產(chǎn)物肽和目標(biāo)肽的產(chǎn)率和純度；創(chuàng)造性的引入N<'α>-Dmb基團(tuán)，提高了困難氨基酸Val的連接率；優(yōu)化了脫保護(hù)的策略以及切割試劑的選擇；通過(guò)質(zhì)譜鑒定分析所得目標(biāo)多肽的分子量，用RP-HPLC進(jìn)行粗肽的分析和純化，系統(tǒng)完整的建立了整套合成純化工藝路線及

2、相關(guān)的工藝參數(shù)，為后續(xù)的工業(yè)化生產(chǎn)奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。采用該合成純化工藝路線，以二氯樹脂為載體，合成的粗肽產(chǎn)率達(dá)到了90.76％，純化后的目標(biāo)肽產(chǎn)率為63.02％純度達(dá)到了98.5％，并實(shí)現(xiàn)了18克每批的合成量。二氯樹脂以其高效率、低成本、產(chǎn)品的高純度完全符合工業(yè)化生產(chǎn)疫苗多肽的各項(xiàng)經(jīng)濟(jì)技術(shù)指標(biāo)。 1.文獻(xiàn)綜述部分，簡(jiǎn)述了丙型肝炎疫苗的研究現(xiàn)狀，詳細(xì)介紹了多肽固相合成技術(shù)中的合成方法、分離純化與鑒定技術(shù)，最后概述了多肽類藥物的應(yīng)用

3、情況與研究展望。 2.采用Fmoc固相法人工合成了疫苗多肽，比較了兩種樹脂在合成過(guò)程中的異同點(diǎn)，對(duì)合成過(guò)程中的幾個(gè)重要步驟和難點(diǎn)進(jìn)行了優(yōu)化和改進(jìn)，如針對(duì)困難氨基酸Val的連接，設(shè)計(jì)了引入N<'α>-Dmb基團(tuán)的獨(dú)特合成策略，提高了連接率及切割效率，確定了合成工藝中相關(guān)的各項(xiàng)工藝技術(shù)參數(shù)。最后用二氯樹脂做為載體進(jìn)行了18克每批的疫苗多肽合成。 3.用RP-HPLC進(jìn)行粗肽的分析和純化，根據(jù)疫苗多肽的理化性質(zhì)采用乙腈-水的流