青蒿素類抗瘧藥體外代謝研究.pdf

1、青蒿素類抗瘧藥是含過氧基團(tuán)的非生物堿倍半萜內(nèi)酯，由于結(jié)構(gòu)中沒有特征的光譜特性，所以早期對(duì)該類藥物代謝及藥動(dòng)學(xué)的研究在一定程度上受到分析方法的限制，因而至今對(duì)其代謝機(jī)理、藥動(dòng)學(xué)性質(zhì)、作用靶點(diǎn)的認(rèn)識(shí)尚不完全透徹。需要對(duì)其進(jìn)行更深入的研究。本論文采用高效液相．柱后衍生化法建立了青蒿素及其衍生物在體外的含量測定分析方法，采用肝微粒體孵化法考察了青蒿素、雙氫青蒿素對(duì)大鼠肝微粒體酶的誘導(dǎo)作用，揭示其具有自身誘導(dǎo)代謝作用，并對(duì)雙氫青蒿素的穩(wěn)定性進(jìn)行研

2、究。 一、青蒿素及其衍生物體外含量測定方法研究采用高效液相．柱后衍生化法建立了青蒿素、青蒿琥酯、雙氫青蒿素在體外的含量測定分析方法。青蒿素的線性范圍為50-2000ng／mL，r=0.9998，濃度定量下限為50 ng/mL，檢測限為20 ng/mL；青蒿琥酯的線性范圍為2～100μg/mL,r=0.9999，濃度定量下限為2μg/ml，檢測限為800ng/mL；雙氫青蒿素的線性范圍為1.5-150μg/mL，r=0.9999，

3、濃度定量下限為1.5μg/mL，檢測限為500ng/mL。該方法靈敏度高，成本低，重現(xiàn)性好，適用于青蒿素、青蒿琥酯、雙氫青蒿素的原料、制劑及提取物的質(zhì)量控制。 二、青蒿素及其衍生物在肝微粒體中的體外代謝研究用紫外可見分光光度法測定肝微粒體蛋白濃度及細(xì)胞色素P450含量。采用高效液相-柱后衍生化法建立了青蒿素、青蒿琥酯、雙氫青蒿素在肝微粒體孵化液中的分析方法，通過該方法考察了青蒿素、青蒿琥酯、雙氫青蒿素在對(duì)照組微粒體和青蒿素或雙氫

4、青蒿素誘導(dǎo)組微粒體中的代謝過程。通過藥物濃度-時(shí)間曲線，計(jì)算主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。青蒿素在青蒿素誘導(dǎo)組微粒體中代謝60 min后，Km、Vmax、Clint值分別由對(duì)照組微粒體中的83.53±16.23μmol/L)、1.86±0.14(μmol/L/min)、2.23±0.03(ml/min·mg pro)上升到105.35±32.64(μmol/L)、5.13±0.33(μmol/L/min)、4.86±0.03(ml/min·mg pr

5、o)；雙氫青蒿素在雙氫青蒿素誘導(dǎo)組微粒體中代謝60 min后，Km、Vmax、Clint值分別由對(duì)照組微粒體中的59.98±17.35(μmol/L)、1.17±0.15(μmol/L/min)、1.95±0.15(ml/min·mg pro)上升到99.99±13.84(μmol/L)、3.20±0.43(μmol/L/min)、3.20±0.07(ml/min·mg pro)；青蒿琥酯在雙氫青蒿素誘導(dǎo)組微粒體中代謝60min后，Km

6、、Vmax、Clint分別由對(duì)照組微粒體中的42.30±7.26(μmol/L)、14.13±1.98(μmol/L/min)、0.33±0.01(ml/min·mg pro)上升到83.17±9.18(μmol/L)、17.85±3.59(μmol/L/min)、0.46±0.03(ml/min·mg pro)。證明青蒿素和雙氫青蒿素具有自身誘導(dǎo)代謝特征。 三、雙氫青蒿素異構(gòu)體轉(zhuǎn)化情況考察采用反相高效液相色譜法，對(duì)雙氫青蒿素α