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文檔簡介
1、蘇丹紅是一種人工合成的紅色染料,主要包括Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ四種類型,被廣泛用于溶劑、油、蠟、汽油的增色以及鞋、地板等增光方面,然而蘇丹紅也被非法添加入食品中以保持其色澤。研究表明,蘇丹紅對小鼠淋巴瘤細胞有顯著的細胞毒性和致突變作用,攝入含較高劑量蘇丹紅的食品就會增加致癌的危險性。本研究中我們進一步闡明蘇丹Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ的致突變分子機制,本試驗采用“小鼠淋巴瘤細胞L5178Y/TK+/-致突變檢測方法”(L5178Y/TK+/- Mouse Ly
2、mphoma Mutation Assay,MLA)來獲得胸苷激酶基因(tk)突變克隆。為了檢測含功能性tk基因的11號染色體(11b)上DNA斷裂情況,我們挑取對照組和經不同濃度蘇丹Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ處理小鼠淋巴瘤L5178Y tk+/--3.7.2細胞得到的tk基因突變克隆,提取DNA,用基于PCR的雜合性缺失(Loss of heterozygosity,LOH)的分析方法考察11號染色體上分布的tk位點的雜合性缺失情況。最后通過Hoec
3、hst33342/PI雙熒光活染法檢測經蘇丹Ⅲ和Ⅳ處理的細胞凋亡情況。從檢測結果來看150μg/mL蘇丹Ⅰ誘導的突變體中大克隆和小克隆發(fā)生LOH的比例分別為85%(17/20)、95%(19/20),所有克隆發(fā)生LOH的比例為90%(36/40);150μg/mL蘇丹Ⅲ誘導的突變體中大克隆和小克隆發(fā)生LOH的比例分別為85.2%(23/27)、100%(15/15),所有克隆發(fā)生LOH的比例為90.5%(38/42);500μg/mL蘇
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