慢性阻塞性肺疾病大鼠ICAM-1、MMP-9的表達(dá)及紅霉素對(duì)其的影響.pdf

1、目的： 本實(shí)驗(yàn)通過予大鼠熏煙及氣管內(nèi)滴入脂多糖（LPS）的方法建立慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠模型，觀察COPD大鼠肺組織中ICAM-1及MMP-9的表達(dá)及紅霉素的干預(yù)作用，以認(rèn)識(shí)和探討ICAM-1和MMP-9在COPD發(fā)病機(jī)制中的作用及體內(nèi)實(shí)驗(yàn)紅霉素對(duì)其的影響，進(jìn)一步認(rèn)識(shí)紅霉素的抗炎作用。 方法： 36只健康雄性Wistar大鼠，體重200±20g，隨機(jī)平均分為3組：模型組：每只大鼠在第1、14天氣管內(nèi)滴入

2、LPS（200ug/100ul），第2～13天、15～30天每日上午予熏煙0.5h，第15天起行生理鹽水2ml灌胃；干預(yù)組：經(jīng)氣管內(nèi)注入LPS、煙熏條件及持續(xù)時(shí)間同COPD組，第15天起在每天熏煙前用紅霉素灌胃治療（劑量100mg/kg），給藥兩周；對(duì)照組：不予被動(dòng)吸煙，玻璃箱內(nèi)用空氣吸入代替煙霧，第1、14天氣管內(nèi)注入生理鹽水100ul，第15天起行生理鹽水2ml灌胃。第30天測(cè)定大鼠肺功能FEV0.3/FVC、氣道阻力（Rl）及動(dòng)態(tài)

3、肺順應(yīng)性（Cdyn）；收集支氣管肺泡灌洗液（BALF）行細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類計(jì)數(shù)；各組大鼠肺組織切片HE染色，觀察肺組織結(jié)構(gòu)的形態(tài)學(xué)變化；免疫組化法檢測(cè)大鼠支氣管肺組織ICAM-1、MMP-9的表達(dá)，對(duì)模型組的數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)性分析。 結(jié)果： （1）模型組及干預(yù)組大鼠大鼠漸出現(xiàn)進(jìn)食、活動(dòng)減少，平均體重較正常組減輕，后期可見毛發(fā)干枯、發(fā)黃，呼吸頻率快，幅度深，偶可聽到喘息；干預(yù)組的一般情況較模型組有所改善；對(duì)照組未見以上情況出現(xiàn)。

4、 （2）模型組及干預(yù)組大鼠FEV0.3/FVC（％）、Cdyn均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05），Rl高于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05）；與模型組相比，干預(yù)組FEV0.3/FVC（％）、Cdyn增高（均P<0.05），Rl降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 （3）與對(duì)照組相比，模型組及干預(yù)組BALF中白細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞數(shù)和中性粒細(xì)胞構(gòu)成比、巨噬細(xì)胞數(shù)顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<

5、0.05）；與模型組相比，干預(yù)組支氣管BALF中白細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞數(shù)和中性粒細(xì)胞構(gòu)成比、巨噬細(xì)胞數(shù)顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 （4）光鏡下模型組及干預(yù)組大鼠肺組織符合慢性支氣管炎和阻塞性肺氣腫病理改變，干預(yù)組病理改變較模型組明顯減輕。 （5）模型組及干預(yù)組支氣管肺組織中ICAM-1及MMP-9的表達(dá)顯著高于對(duì)照組（均P<0.05），與模型組比較，干預(yù)組ICAM-1及MMP-9的表達(dá)降低有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（

6、P<0.05）。 （6）模型組數(shù)據(jù)的相關(guān)性分析：BALF中白細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞數(shù)、巨噬細(xì)胞數(shù)與FEV0.3/FVC呈負(fù)相關(guān)（分別為r=-0.61，P<0.05； r=0.80，P<0.01；r=-0.67，P<0.05）； ICAM-1的表達(dá)與BALF中白細(xì)胞總數(shù)及中性粒細(xì)胞數(shù)成正相關(guān)關(guān)系（分別為r=0.83，P<0.01； r=0.68，P<0.05），MMP-9的表達(dá)與BALF中白細(xì)胞總數(shù)及中性粒細(xì)胞數(shù)成正相關(guān)關(guān)系（分別為

7、r=0.62，P<0.05； r=0.60，P<0.05）； ICAM-1的表達(dá)與FEV0.3/FVC（％）成負(fù)相關(guān)關(guān)系（r=0.70，P<0.01），MMP-9的表達(dá)與FEV0.3/FVC（％）成負(fù)相關(guān)關(guān)系（r=0.71，P<0.05）； ICAM-1與MMP-9的表達(dá)成正相關(guān)關(guān)系（r=0.71，P<0.01）。 結(jié)論： （1）采用被動(dòng)吸煙和氣管內(nèi)滴注LPS法可成功建立COPD大鼠模型，該模型符合人類COPD的病理特點(diǎn)