版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)
文檔簡介
1、第一部分:膿毒癥大鼠血小板活化的研究 物p一血農(nóng)毒癥大鼠血小板計數(shù)和血小板活化標記物p一血小板球蛋白(p-TG)、血小板主狀態(tài)F4)血清濃度,探討膿毒癥大鼠血小板活性狀態(tài)的變化及其意義。L穿孑時象分為假手術(shù)術(shù)后6h、24h組和盲腸結(jié)扎穿孔(CLP)術(shù)后6h、24h組,手術(shù)丑盲腸結(jié)扎穿孔法制作膿毒癥大鼠模型,假手術(shù)組不行盲腸結(jié)扎穿孔。大鼠躉4,j留取血液標本行血氣、肝腎功能等常規(guī)檢測,并檢測血小板計數(shù)及采用酶缸小付(ELISA)方
2、法檢測血清B一血小板球蛋白、血小板第4因子濃度;并留取肺. 術(shù)后6h及24h組,假手術(shù)組與CLP組之間的差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。氣,肝。腎功能及肺肝腎病理結(jié)果表明本研究中的CLP模型較好地模擬了膿辜癥大鼠血小板計數(shù)較正常大鼠下降,尤其在CLP術(shù)后24h組下降更為明走大鼠血小板活化標志物p-’FG和PF4濃度較正常大鼠升高,尤其在CLP且升高更為明顯;提示膿毒癥大鼠存在血小板活化現(xiàn)象,且膿毒癥病情越重七程度越明顯。
3、 第二部分:膿毒癥大鼠血小板蛋白質(zhì)組學(xué)的研究 [目的] 觀察膿毒癥大鼠血小板蛋白質(zhì)組的變化,從血小板整體蛋白質(zhì)水平探討膿毒癥的病理生理機制,為臨床診治膿毒癥提供理論依據(jù)。 [方法] 實驗分2組:假手術(shù)組及CLP術(shù)后24h組,每組6只大鼠。然后分別于手術(shù)后24h經(jīng)頸動脈插管取血。分離血小板,應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)提取血小板總蛋白,利用固相pH梯度及SDS-PAGE二維凝膠電泳分離血小板總蛋白,考馬斯亮藍染
4、色、imagescanner掃描、PDQuest軟件圖像分析找出差異表達蛋白質(zhì)點,應(yīng)用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜分析(MALDI-TOF-MS)及Mascot查詢軟件、NCBI、MSDB數(shù)據(jù)庫鑒定差異表達蛋白。對質(zhì)譜鑒定出的差異表達蛋白質(zhì)FGG進行免疫印跡(Western blot)方法分析,驗證FGG在兩組大鼠血小板中的表達情況。 [結(jié)果] 1每組6張膠上表達的蛋白質(zhì)點數(shù)分別為2094±355,1769±229個
5、;平均匹配率分別為93%、91%;等電聚焦(IEF)方向位置偏差分別為(0.79±0.24)mm.、(0.71±0.40)mm;SDS-PAGE方向位置偏差分別為(1.0±0.31)mm、(1.1±0.42)mm。 2篩選出差異表達蛋白質(zhì)點20個,進行質(zhì)譜分析質(zhì)譜峰信噪比均高,經(jīng)查詢蛋白質(zhì)序列數(shù)據(jù)庫鑒定了7個蛋白質(zhì)點,對應(yīng)8種蛋白質(zhì),分別為肌球蛋白輕鏈、琥珀酸脫氫酶復(fù)合體亞基B、ATP合酶β亞基、絲氨酸蛋白酶抑制劑、纖維蛋白原γ
6、鏈、α1-抗胰蛋白酶前體、蛋白質(zhì)二硫化物異構(gòu)酶A3。 3圖像分析發(fā)現(xiàn)在鑒定出的蛋白質(zhì)中,對照組與膿毒癥組比較除蛋白質(zhì)二硫化物異構(gòu)酶A3和肌球蛋白輕鏈表達下調(diào)外,其余幾種蛋白均上調(diào)。 4 Western blot方法驗證膿毒癥后血小板FGG的表達結(jié)果顯示,CLP術(shù)后血小板FGG表達升高,與2-DE結(jié)果一致。 [結(jié)論] 1本研究建立了圖像清晰、分辨率高、重復(fù)性好的膿毒癥大鼠血小板蛋白質(zhì)固相pH梯度2-DE圖譜
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 膿毒癥患者血小板蛋白質(zhì)組學(xué)的研究.pdf
- 鮑曼不動桿菌膿毒癥大鼠中性粒細胞的蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf
- 膿毒癥大鼠骨骼肌蛋白高分解代謝的蛋白質(zhì)組研究.pdf
- 應(yīng)用血小板蛋白質(zhì)組學(xué)方法篩選ITP患兒血小板蛋白標志物.pdf
- 丹七方抗大鼠血小板聚集的蛋白質(zhì)組學(xué)及藥動學(xué)研究.pdf
- 基于蛋白質(zhì)組學(xué)策略的膿毒癥生物標志物研究.pdf
- 特發(fā)性血小板減少性紫癜患兒血小板蛋白質(zhì)組學(xué)的研究.pdf
- 膿毒癥患者血小板膜糖蛋白及血小板參數(shù)的相關(guān)研究
- 薤白皂苷抑制ADP誘導(dǎo)大鼠血小板活化及聚集的蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf
- 膿毒癥大鼠血小板生成素水平與膿毒癥嚴重程度的關(guān)系.pdf
- 急性淋巴細胞白血病患兒血小板蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf
- 大鼠移植心臟的蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf
- 大鼠肝臟再生的蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf
- 大鼠移植肺的蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf
- 膿毒癥相關(guān)血小板減少癥
- 雙重抗血小板對膿毒癥大鼠血小板功能和急性腎損傷影響的實驗研究.pdf
- 急性特發(fā)性血小板減少性紫癜發(fā)病機制的蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf
- 膿毒癥性血小板減少癥課件
- 血小板活化與膿毒癥大鼠心肌損傷的關(guān)系及雙重抗血小板保護作用.pdf
- 雙聯(lián)抗血小板對膿毒癥大鼠血小板功能和急性肺損傷影響的實驗研究.pdf
評論
0/150
提交評論