血小板活化與膿毒癥大鼠心肌損傷的關(guān)系及雙重抗血小板保護(hù)作用.pdf

1、目的:探討血小板活化參與內(nèi)毒素性心肌損傷的機(jī)制和氯吡格雷聯(lián)合阿司匹林雙重抗血小板的保護(hù)作用。
　　方法:40只健康雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為正常組，內(nèi)毒素組，阿司匹林組，氯吡格雷組，阿司匹林聯(lián)合氯吡格雷組，每組8只。正常組、內(nèi)毒素組均給予生理鹽水(1ml)，阿司匹林組、氯吡格雷組、聯(lián)合藥物組，則分別給予阿司匹林(100mg/kg)、氯吡格雷(200mg/kg)、阿司匹林(100mg/kg)+氯吡格雷(200mg/kg)灌胃三天預(yù)

2、處理后，除正常組外，余組均給予LPS10mg/kg腹腔注射造模。造模6h后采集標(biāo)本進(jìn)行分析。心臟彩超測(cè)大鼠心輸出量(cardiac output，CO)、射血分?jǐn)?shù)(ejectionfraction，EF)、左心室舒張末期內(nèi)徑(LVDd)、左心室收縮末期內(nèi)徑(LVDs);檢測(cè)血清肌鈣蛋白Ⅰ(Cardiac troponin，cTnI)，白細(xì)胞介素-6（IL-6），腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor-α，TNF-α

3、)，濃度，血小板聚集率測(cè)定。流式細(xì)胞儀測(cè)血小板膜糖蛋白(CD62P)、Toll樣受體-4(Toll-like receptors TLR-4)表達(dá)水平。比較心肌干/濕重比(D/W)，光鏡下觀察心肌組織病理。
　　結(jié)果：
　　1、大鼠行為表現(xiàn):正常組:大鼠毛發(fā)光亮、活動(dòng)正常、刺激反應(yīng)靈敏。內(nèi)毒素組:脂多糖(LPS)注射半個(gè)小時(shí)后，大鼠活力開始減弱，刺激反應(yīng)減弱;大約1h后，出現(xiàn)少動(dòng)，群居，反應(yīng)遲鈍;6h后叫聲減弱，毛發(fā)蓬松、掉

4、毛，有些大鼠出現(xiàn)抽搐現(xiàn)象，對(duì)刺激反應(yīng)弱。藥物干預(yù)組:LPS注射前3天灌胃給予氯吡格雷和阿司匹林后大鼠行為表現(xiàn)與正常組無差異;LPS注射6h后，聯(lián)合藥物組活動(dòng)力、刺激反應(yīng)稍減弱;進(jìn)食無明顯改變。而單用藥物組大鼠活動(dòng)力、刺激反應(yīng)均明顯減弱，進(jìn)食減少。
　　2、光鏡下心肌組織病理變化:正常組:心肌纖維排列整齊、完整，間質(zhì)無水腫，纖維互聯(lián)呈網(wǎng)狀，細(xì)胞核清晰可見，核膜完整。內(nèi)毒素組:可見炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，心肌間質(zhì)水腫充血。藥物干預(yù)組:炎癥均有所

5、減輕，而雙重抗血小板組則更顯著。
　　3、各組大鼠左心室大小變化比較與正常組比較，LPS腹腔注射造模后，各組大鼠左心室舒張和收縮末期內(nèi)徑均有所增大，但藥物干預(yù)組比單純內(nèi)毒素組比較增大幅度減小，其中以聯(lián)合藥物組最明顯。
　　4、各組大鼠心功能指標(biāo)和心肌損傷壞死標(biāo)志物肌鈣蛋白Ⅰ比較:與正常組比較，內(nèi)毒素組血清cTnI明顯升高，EF明顯下降(P＜0.01)。與內(nèi)毒素組比較，藥物干預(yù)組，血清cTnI均有所降低，EF表現(xiàn)為回升(P＜0

6、.05)，以聯(lián)合用藥組組效果最明顯(P＜0.01)。
　　5、各組大鼠血清TNF-α、IL-6水平，以及心肌組織干濕重比比較:與正常組比較，內(nèi)毒素組血清TNF-α、IL-6均明顯升高，而心肌干濕重比(D/W)明顯下降(P＜0.01)。與內(nèi)毒素組比較，藥物干預(yù)組血清TNF-α、IL-6，而心肌干濕重比(D/W)表現(xiàn)為回升(P＜0.05)以聯(lián)合藥物組組效果最明顯(P＜0.01)。
　　6、各組大鼠CD62P，TLR-4表達(dá)率和血

7、小板聚集率的變化比較:與正常組比較，內(nèi)毒素組血小板聚集率以及CD62P、TLR-4陽性表達(dá)率，均明顯升高(P＜0.01)。與內(nèi)毒素組比較，藥物干預(yù)組，血小板聚集率，CD62P、TLR-4陽性表達(dá)率均有所降低(P＜0.05)，以聯(lián)合組效果最明顯(P＜0.01)。
　　結(jié)論:
　　1、血小板活化后通過釋放炎癥因子參與膿毒癥心肌損傷的過程。
　　2、阿司匹林聯(lián)合氯吡格雷雙重抗血小板比單一制劑更有效抑制LPS誘導(dǎo)的血小板活化，