BMSCs和EPCs聯(lián)合移植治療大鼠缺血性腦損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:
　　比較BMSCs和EPCs細(xì)胞聯(lián)合移植與BMSCs或EPCs單獨(dú)移植對(duì)缺血性腦損傷的治療效果,探討細(xì)胞聯(lián)合移植對(duì)大鼠缺血性腦損傷后神經(jīng)功能修復(fù)作用及機(jī)制。
　　方法:
　　采用全骨髓培養(yǎng)法和細(xì)胞貼壁法培養(yǎng)獲得BMSCs,采用密度梯度離心法和細(xì)胞貼壁法獲取EPCs。線栓法制作SD大鼠大腦中動(dòng)脈缺血模型(MCAO)(n=80),根據(jù)神經(jīng)功能評(píng)分隨機(jī)分為模型對(duì)照組(n=16)、PBS對(duì)照組(n=16)、BMSCs移

2、植組(n=16)、EPCs移植組(n=16)和細(xì)胞聯(lián)合移植組(n=16)。缺血2h后再灌注24h,通過缺血側(cè)頸動(dòng)脈分別注射2×106 BMSCs、2×106EPCs、等體積2×106BMSCs和2×106EPCs、等體積PBS液于BMSCs移植組、EPCs移植組、細(xì)胞聯(lián)合移植組、PBS對(duì)照組;模型對(duì)照組不做任何處理。另設(shè)假手術(shù)組(n=8)。干預(yù)處理4周后評(píng)價(jià)神經(jīng)功能得分、觀察細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)、觀測(cè)腦梗死體積及梗死周邊區(qū)BDNF表達(dá)情況。

3、r>　　結(jié)果:
　　1.神經(jīng)功能評(píng)分:假手術(shù)組與正常SD大鼠比較差異無顯著性意義,模型對(duì)照組、PBS對(duì)照組、BMSCs移植組、EPCs移植組、細(xì)胞聯(lián)合移植組評(píng)分依次為3.56±0.37分、3.71±0.18分、2.34±0.10分、2.41±0.06分、1.12±0.29分。細(xì)胞移植組與模型對(duì)照組、PBS對(duì)照組分別比較差異有顯著性意義(P<0.05)。細(xì)胞聯(lián)合移植組分別與其它各組比較差異均有顯著性意義(P<0.05)。
　　

4、2.腦梗死體積:模型對(duì)照組、PBS對(duì)照組、BMSCs移植組、EPCs移植組、細(xì)胞聯(lián)合移植組腦梗死體積依次為199.38±15.67 mm3、192.12±17.63mm3、141.00±12.51mm3、108.12±9.54mm3、84.75±12.85 mm3。細(xì)胞移植組與模型對(duì)照組、PBS對(duì)照組分別比較差異有顯著性意義(P<0.05)。細(xì)胞聯(lián)合移植組分別與其它各組比較差異均有顯著性意義(P<0.05)。EPCs移植組與BMSCs移

5、植組比較差異亦有顯著性意義(P<0.05)。
　　3.梗死周邊區(qū)BDNF表達(dá)情況:模型對(duì)照組、PBS對(duì)照組、BMSCs移植組、EPCs移植組、細(xì)胞聯(lián)合移植組梗死周邊區(qū)BDNF表達(dá)陽性細(xì)胞數(shù)依次為(個(gè)/視野):3.51±0.54、5.10±0.39、32.46±3.11、16.32±2.84、58.69±8.37。細(xì)胞移植組與模型對(duì)照組、PBS對(duì)照組分別比較差異有顯著性意義(P<0.05)。細(xì)胞聯(lián)合移植組與其它各組比較差異均有顯著性

6、意義(P<0.05)。BMSCs移植組與EPCs移植組比較差異亦有顯著性意義(P<0.05)。
　　結(jié)論:
　　1、BMSCs和EPCs聯(lián)合移植治療缺血性腦損傷的療效優(yōu)于BMSCs或EPCs單細(xì)胞移植。
　　2、BMSCs和EPCs聯(lián)合移植治療能促進(jìn)缺血性腦損傷大鼠神經(jīng)功能的修復(fù),其作用機(jī)制可能是:一方面BMSCs移植增加了腦內(nèi)BDNF的自分泌或旁分泌,參與缺血區(qū)腦細(xì)胞的再生;另一方面EPCs移植促進(jìn)了梗死區(qū)新生血管生